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1. (2023高三上·开远月考) EPO是促红细胞生成素的英文简称，是一种激素样物质，可促进体内新红细胞生成。人类已可通过基因工程合成EPO基因，并采用中国仓鼠卵巢（CHO）细胞表达系统来获取产物，其过程如下。请回答下列问题：
1. （1）从人体组织中提取EPO的mRNA，通过逆转录得到，再通过技术获得大量EPO基因。基因工程的核心步骤是，图中①过程用到的工具酶有。
3. （2）为使供体母鼠超数排卵，需注射激素以排出更多的卵子，卵子培养到（时期）与获能的精子完成体外受精。
5. （3）采用技术，将重组表达载体导入小鼠受精卵中。
7. （4）当胚胎发育至时期可进行胚胎移植，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行。
9. （5）若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO，可采用技术对血液进行检测。
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1. (2023高二下·肥西期末) 研究人员利用AFPs抗冻基因和Ti质粒构建重组质粒，选择所需重组质粒转入番茄植株，培育抗冻番茄，主要操作过程如下图。抗冻番茄经低温诱导后可溶性蛋白均比对照明显增加，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳可检测到可溶性蛋白的C区和B区染色加深。已知三种限制酶的识别序列及酶切位点如下表所示。请回答下列问题：

限制酶	BamH I	Bgl Ⅱ	EcoR I
识别序列及酶切位点	—G↓GATCC	—A↓GATCT	—G↓AATTC—

（1）构建重组质粒时，应选择、（酶）分别切割质粒和含AFPs抗冻基因的外源DNA。
（2）培育转基因植物时，常选择Ti质粒作为目的基因载体的原因是。将导入了表达载体的农杆菌与取自番茄的细胞共同培养，通过农杆菌的作用就可使目的基因进入番茄细胞，为筛选成功导入抗冻基因的番茄细胞，需在培养基中添加。通过过程④获得完整的植株，依据的原理是。与常规的种子繁殖方法相比，利用该技术培育抗冻番茄植株的优点是。
（3）可通过聚丙烯酰胺凝胶电泳检测经低温诱导后抗冻番茄植株中的可溶性蛋白，若，则表明AFPs基因已表达出相应的蛋白质；也可采用进行个体生物学水平的检测。

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1. (2023高三上·河源开学考) 重症联合免疫缺陷（简称SCID）的发病率估计为1/100000，主要表现为体液免疫和细胞免疫缺陷，属于联台免疫缺陷病中最严重的类型，绝大部分儿童表现为淋巴细胞减少症，未经治疗，重症联合免疫缺陷绝大部分具有致死性，患儿经常于1岁内死亡。研究发现，IKK激酶参与动物体内免疫细胞的分化。临床上发现某SCID患儿IKK基因编码区第1183位碱基T突变为C，导致IKK上第395位酪氨酸被组氨酸代替。为研究该患儿发病机制，研究人员利用纯合野生鼠为材料应用PCR定点诱变技术获得突变基因并培育出SCID模型小鼠（纯合）。回答下列问题：
1. （1）在使用PCR定点诱变技术获得突变基因的过程中，需要酶的催化。还需要加入引物（一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸），引物的作用是。
3. （2）如图为杂合转基因鼠F₀的培育过程，突变基因不能直接导入小鼠的受精卵，需要先构建，具体操作流程是。培育杂合转基因鼠F₀的过程中，将桑葚胚移植到代孕母鼠中能存活并发育，原理是。
5. （3）研究人员经鉴定、筛选获得一只转基因杂合鼠F₀ ，并确认突变基因已经稳定同源替代IKK基因。怎样利用转基因杂合鼠F₀获得纯合SCID模型鼠?请补充完整。
  ①实验思路：
  
  ②提取F₂每只小鼠的基因组DNA，采用分子生物学方法，利用IKK基因探针和突变基因探针进行筛选。如何区分纯合SCID模型鼠和杂合鼠，筛选方法是。
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1. (2023高二下·吉林期末) 下列关于基因工程和蛋白质工程的叙述不正确的是（）

A . 将某蛋白基因导入牛的乳腺细胞后可形成乳腺生物反应器 B . 蛋白质工程可以改造现有的蛋白质或制造出新的蛋白质 C . 蛋白质工程是基因工程的延伸，不需要对基因进行操作 D . 从工程菌大肠杆菌中获得的人类干扰素可直接使用

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1. (2023高二下·白山期末) 下列不属于利用基因工程技术生产药物的是（）

A . 从酵母菌体内获得干扰素 B . 从奶牛乳腺分泌的牛奶中获得人胰岛素 C . 从大肠杆菌体内获得白细胞介素 D . 从毛霉菌体内获得蛋白酶和脂肪酶

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1. (2023高二下·白山期末) 科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。下列说法错误的是（）

A . 将目的基因转入小鼠细胞前，应先将人的生长激素基因与农杆菌的T-DNA结合 B . 将含有人的生长激素基因的载体导人小鼠受精卵 C . 人的生长激素基因存在于小鼠的绝大多数细胞中 D . 采用PCR技术检测人的生长激素基因是否插入了小鼠的基因组

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1. (2023高二下·白山期末) 下列不属于传统发酵技术的是（）

A . 利用葡萄自然发酵制作葡萄酒 B . 利用毛霉发酵制作腐乳 C . 利用乳酸菌发酵制作泡菜 D . 利用青霉菌的培养大量生产青霉素

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1. (2023高二下·舟山期末) 火龙果在低温下幼嫩茎段会部分受到伤害，脂质转移蛋白（LTPs）被证实在植物抵抗低温胁迫中有重要作用，控制该蛋白合成的基因结构如图1所示。某课题研究组将LTP基因导入火龙果愈伤组织，以获得抗寒能力强的火龙果。回答下列问题：
1. （1）采用PCR技术克隆LTP基因时，为使目的基因能与图2所示的载体准确连接，将NcoI和BstEII两种限制酶的识别序列分别添加在引物、引物（填引物编号）的（填“3'端”或“5'端”）。
3. （2）将构建的表达载体与经处理获得的感受态根癌农杆菌混合，通过液体悬浮培养完成和细胞复苏，再将菌液涂布在含的培养基上培养，挑取单菌落进行PCR鉴定，以获得的根癌农杆菌。
5. （3）从田间取得的火龙果茎段经处理后，诱导其形成愈伤组织，加入（2）中获得的根癌农杆菌共同培养，再转入含抗生素的培养基，此时添加抗生素的主要目的是。
7. （4）经上述处理后的愈伤组织放入含X一Gluc的选择培养基中培养，选取色的愈伤组织，继续培养得到幼苗。为进一步确定该幼苗中的LTP基因是否表达，从转基因细胞中提取蛋白质，经处理固定在硝酸纤维素膜上，让待测蛋白质与发生抗原抗体杂交。除分子水平的检测方法外，还可以用。
  
  （注：图1箭头表示目的基因的转录方向；图2：NcoI和BstEII为不同限制酶的识别位点；T-DNA中标出的启动子属于真核细胞表达系统；GUS基因编码产生的β-葡萄糖苷酸酶能将无色物质X-Gluc分解，使植物组织呈蓝色，否则为白色）
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1. (2023高二下·玉溪期末) 阅读如下资料，判断下列各项描述不合理的是（）
资料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”。
资料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。

A . 甲属于基因工程，乙属于蛋白质工程 B . 甲中将目的基因导入小鼠受精卵中常用显微注射法 C . 乙中通过对基因改造实现了对蛋白质的改造 D . 从资料乙可看出，T4溶菌酶是一种直接利用氨基酸制造出来的新蛋白质

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1. (2023高二下·南宁期末) 科学家通过基因工程，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉。其过程大致如图所示：
1. （1）从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因，需要用到的工具是，可采用技术对Bt毒蛋白基因进行大量扩增。
3. （2）基因表达载体的组成有Bt毒蛋白基因、启动子、终止子以及等，启动子是识别和结合的部位。
5. （3）用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上有，它能将Bt毒蛋白基因整合到棉花细胞的上。
7. （4）检测Bt毒蛋白基因在抗虫棉中是否成功表达，在分子水平上的检测方法是。
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