限制酶种类 |
SpeⅠ |
PvitⅡ |
BamHⅠ |
XbaⅠ |
识别序列 |
5'A↓CTAGT3′ |
5'CAG↓CTG3′ |
5'G↓GATCC3′ |
5'T↓CTAGA3′ |
引物的(填“3’端”或“5'端”)添加限制酶识别序列。据图可推断,扩增α链时需添加的限制酶识别序列以及所用引物的碱基序列是5'3'。已知AUG为PHB2蛋白合成的起始密码子,则构建符合要求的表达载体所用的工具酶有PvitI、。
注:Lac2基因可使细菌利用加入培养基的物质X-gal,从而使菌落显现出蓝色。若无该基因或该基因被破坏,则菌落则呈白色。
结果显示:。
表2培养转基因四尾栅藻的地热废水各项指标总定结果
各项指标 |
总氮(mg/L) |
总磷(mg/L) |
氧化物(mg/L) |
废水培养基 |
23.2 |
4.32 |
4.56 |
培养转基因四尾栅藻11天后 |
1.9 |
0.45 |
0.84 |
该实验不能说明转DGATI基因显著提高了四尾栅藻的去污能力。请写出进一步完善实验设计的思路。
回答下列问题。
(i)导入目的基因的酵母菌应在的培养基上筛选培养。由于需要导入多种酶基因,需要多次筛选,因此在导入一种目的基因后,要切除UGA基因,再重新导大。研究人员在UGA基因序列两端加上酵母菌DNA中不存在的同源C.C'序列,以便对UGA基因进行切除。C.C'的序列方向将影响切割时同源序列的配对方式,进而决定DNA片段在切割后是否可以顺利重连,如图,则应选择方式进行连接。
(ii)切去UGA基因的酵母菌应在的培养基上筛选培养。