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高中生物学
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1. 重症联合免疫缺陷(简称SCID)的发病率估计为1/100000,主要表现为体液免疫和细胞免疫缺陷,属于联台免疫缺陷病中最严重的类型,绝大部分儿童表现为淋巴细胞减少症,未经治疗,重症联合免疫缺陷绝大部分具有致死性,患儿经常于1岁内死亡。研究发现,IKK激酶参与动物体内免疫细胞的分化。临床上发现某SCID患儿IKK基因编码区第1183位碱基T突变为C,导致IKK上第395位酪氨酸被组氨酸代替。为研究该患儿发病机制,研究人员利用纯合野生鼠为材料应用PCR定点诱变技术获得突变基因并培育出SCID模型小鼠(纯合)。回答下列问题:
(1) 在使用PCR定点诱变技术获得突变基因的过程中,需要
酶的催化。还需要加入引物(一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸),引物的作用是
。
(2) 如图为杂合转基因鼠F
0
的培育过程,突变基因不能直接导入小鼠的受精卵,需要先构建
,具体操作流程是
。培育杂合转基因鼠F
0
的过程中,将桑葚胚移植到代孕母鼠中能存活并发育,原理是
。
(3) 研究人员经鉴定、筛选获得一只转基因杂合鼠F
0
, 并确认突变基因已经稳定同源替代IKK基因。怎样利用转基因杂合鼠F
0
获得纯合SCID模型鼠?请补充完整。
①实验思路:
②提取F
2
每只小鼠的基因组DNA,采用分子生物学方法,利用IKK基因探针和突变基因探针进行筛选。如何区分纯合SCID模型鼠和杂合鼠,筛选方法是
。
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