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1. (2024高三下·安顺模拟) 实验小组从甲醛含量丰富的工厂活性污泥中筛选出了能快速降解甲醛的菌株W，用于甲醛降解的生物处理，并探究了甲醛浓度对甲醛降解率的影响，实验结果如图所示。下列说法错误的是（）

A . 筛选培养基中的甲醛能为菌株W的生长提供碳源 B . 在350mg·L^-1和600 mg·L^-1时，菌株W的降解甲醛的量相同 C . 浓度超过750 mg·L^-1后，高浓度的甲醛可能会抑制菌株的活性 D . 筛选后的培养基在丢弃前可用高压蒸汽锅进行灭菌处理

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1. (2024高三下·广西壮族自治区模拟) 蓝莓果酒和蓝莓果醋中含有大量的花青素、维生素和矿物质，具有提高视力、抗氧化、抗衰老和美容养颜等功能，深受人们的喜爱。下列有关蓝莓果酒和果醋制作的叙述，错误的是（）

A . 制作果酒和果醋利用的主要微生物分别是酵母菌和醋酸菌 B . 蓝莓果酒发酵液可能使酸性重铬酸钾溶液由蓝变绿再变黄 C . 对蓝莓果醋的发酵液稀释涂布，可检测醋酸菌的种群数量 D . 在蓝莓果酒发酵基础上进行果醋制作，需改变温度和通气性

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1. (2024高三下·广西壮族自治区模拟) 近年来，卒中、脑梗、心梗等心脑血管病患病率持续上升。2023年11月国家卫健委发布《心脑血管疾病防治行动实施方案》推进对患者的救治和防病工作。
1. （1）卒中、脑梗、心梗等心脑血管病多是因动脉粥样硬化、血栓引起组织缺血所致。血栓由纤维蛋白构成，组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）由527个氨基酸构成（如下图）， t-PA 进入血浆后激活纤溶酶原，使之转化成纤溶酶，酶将沉积在血管内壁的纤维蛋白分解血栓裂解，血管畅通。t-PA进入血浆后多与纤溶酶原激活剂抑制物形成复合物，很快失去活性，所以溶栓时要持续输入t-PA。然而，大剂量t-PA易诱发出血。鉴于此，有人提出通过抑制的活性，以延长t-PA的活性。进一步研究显示，t-PA第84位的半胱氨酸替换为丝氨酸后的t-PA溶血栓更快，这种改造的t-PA副作用更小。用生物化学手段直接改造“t-PA”蛋白质的结构，或是定点改造 t-PA 基因成为“突变基因”，通过基因工程等生物工程技术获取“突变的t-PA”。通过后者改造“t-PA”的主要优势是（写出一点）。
3. （2）已知t-PA基因碱基序列、丝氨酸密码子，可以通过人工合成目的基因（t-PA 突变基因）、基因与质粒重组构建表达载体、表达载体进入受体细胞等一系列操作，最终获取“突变的t-PA”。这种基于t-PA的分子结构和功能的关系，通过一系列DNA 分子层面的操作获取人类所需蛋白产品的第二代基因工程过程又叫做。
5. （3）从上述人t-PA 基因获得第84位半胱氨酸替换为丝氨酸编码序列的t-PA突变基因，常借助PCR体外定点定向诱变获得。工作原理如图：先合成包含突变碱基的两个突变引物。因突变点不位于基因端点，要借助 PCR 获得完整的t-PA 突变基因，还要合成两个正常引物1、2.参考图中正常引物1（5'-TACCAAGTGATCTGCAGA-3'）、t-PA 基因和 PCR 诱变过程原理图，正常引物2 是5’……-3’（写出5’端的6个碱基即可）
7. （4）为了与质粒高效连接，t-PA突变基因两端应携带相应的限制酶识别序列。应将限制酶识别序列设计在两条正常引物的端。限制酶能够使 DNA 分子中特定部位的键断开。
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1. (2024高三·贵阳模拟) 丙草胺（C₁₇H₂₆ClNO₂）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是（　　）

A . 该实验中土样稀释了10⁶倍 B . 利用该方法计数结果往往比活菌的实际数目偏小 C . 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×10⁹个 D . 配制以丙草胺为唯一营养成分的选择培养基进行培养，可以分离出降解菌

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1. (2024高三下·黔西模拟) 下列有关传统发酵技术和微生物培养技术中的操作，错误的是（）

A . 用赤霉素处理大麦，可使大麦种子无须发芽就能产生α-淀粉酶 B . 自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌种是野生型酵母菌 C . 泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气 D . 平板划线时，每次划线前后都需将接种环放在酒精灯火焰上灼烧

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1. (2024高三下·关岭模拟) 科研人员构建了可表达GM-CSF（一种细胞因子）的重组质粒，以增加白细胞数量，通过基因工程技术大量生产GM-CSF，满足临床需求。M-CSF基因及相关限制酶的酶切位点如图所示。请回答下列问题。
1. （1）利用PCR技术扩增CM-CSF基因时，需要在引物上添加限制酶的识别序列，同时也便于与质粒正确连接。
3. （2）质粒和GM-CSF基因结合形成的重组质粒在受体细胞中能够稳定存在并发挥作用，在CM-CSF基因的首端必须具有，其作用是。
5. （3）筛选已导入GM-CSF基因的大肠杆菌时，先将大肠杆菌接种到含有抗生素的培养基中培养，从获得的菌落中取菌体接种到含有抗生素的培养基中，若（填“有菌落生长”或“无菌落生长”），则获得的培养物符合要求。
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1. (2024·贵州模拟) 土壤中的尿素分解菌能产生脲酶，脲酶可将尿素分解成NH₃ ， NH₃再转化为 $\text{[math]}$ $\text{[math]}$ 等被植物吸收。现使用稀释涂布平板法对已分离培养的尿素分解菌进行计数，下列有关叙述正确的是（）

A . 同一稀释度至少需设置3个平板进行重复计数 B . 涂布器灼烧灭菌后立即涂布可以避免感染杂菌 C . 涂布时需注意不能转动培养皿以避免菌液洒出 D . 稀释涂布平板法统计的菌落数比实际活菌数高

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1. (2024·贵州模拟) 在植物基因工程中外源基因表达量不足是目前利用转基因植物生产植物疫苗时存在的问题之一。研究表明，启动子的串联能增强外源基因的表达，研究人员拟构建含有两个35s启动子（35s启动子是花椰菜花叶病毒的一种强启动子）串联的转基因苜蓿。一个35s启动子包括1个A区和2个B区。图甲表示35s启动子及其附近区域分布的限制酶识别位点，已知不同限制酶切割后得到的黏性末端各不相同。图乙表示待转入第二个35s启动子的重组质粒的构成组件及其上的限制酶识别位点。
1. （1）利用PCR技术可以扩增35s启动子，PCR技术的原理是，此技术设计引物很关键，引物是。利用此技术扩增的35s启动子可以在PCR扩增仪中自动完成，完成以后，常采用来鉴定PCR的产物。
3. （2）根据限制酶识别位点，为了让第二个35s启动子准确串联在待转入的重组质粒上，应选择限制酶切割图甲的DNA片段。
5. （3）为了筛选出正确串联了两个35s启动子的新重组质粒菌落，研究人员用含有不同抗生素的平板进行筛选，平板类型丙和丁加入的抗生素分别是、，得到①②③三类菌落，其生长状况如下表（+代表生长，-表示不生长）。根据表中结果判断，应选择的菌落是（填“①”“②”或“③”）类。若新获得的转基因苜蓿中目的基因的表达量大幅增加，可以说明串联两个35s启动子能。
  平板类型
  ①
  ②
  ③
  甲：无抗生素
  +
  +
  +
  乙：卡那霉素
  -
  -
  +
  丙：？
  -
  +
  +
  丁：？
  -
  -
  +
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1. (2024·贵州模拟) 酱油是以大豆、小麦或麦麸为原料，依靠微生物发酵而生产的一种液态调味品。如图展示了某企业通过发酵制作酱油的过程，下列叙述错误的是（）

A . 米曲霉发酵过程需要通入空气并搅拌，可判断米曲霉属于异养好氧微生物 B . 在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于真核生物 C . 添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是酒精和二氧化碳 D . 发酵池中加入的食盐可以抑制杂菌的生长和繁殖

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1. (2024高三下·韶关模拟) 研究人员发现堆肥中的固氮菌可有效减少堆肥过程中的氮损失，并成功从高温堆肥样品中筛选出了高效嗜热固氮菌。下列有关叙述错误的是（　　）

A . 筛选实验中所用样品最好从处于高温期的堆肥中选取 B . 筛选实验中需将样品适当稀释后涂布在含氮培养基上 C . 筛选所得目的菌需接种到堆肥中用以检测其保氮效果 D . 大规模发酵生产制成的该活菌可用于生产微生物肥料

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丙：？	-	+	+
丁：？	-	-	+