（1） 从自然界筛选BA-KA4解淀粉芽孢杆菌的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→计数及性能测定。富集培养时要将装有培养液的锥形瓶放置在摇床上，其目的是提高培养液中的， 可利用方法对土壤样品中的微生物进行分离纯化并计数，筛选获得BA-KA4解淀粉芽孢杆菌。

（2） 为了确定起主要抑菌作用的是BA-KA4菌体细胞，还是BA-KA4菌体释放到胞外的抑菌物质，实验步骤如下：

①挑取BA-KA4菌株单菌落接种于液体培养基中，28℃恒温培养48h，离心收集上清液并过孔径0.22μm的滤膜得到无菌发酵液。收集离心获得的菌体，超声波破碎，用培养基稀释到原体积，经离心收集上清液为菌体破碎液。

②实验组和对照组处理如下表：请完善实验方案中的I

组组别	第一步	第二步	第三步	抑菌率
		倒入25mLPDA培养基， 待培养基凝固后，在中央接入直径5mm的灰霉菌菌块	22℃恒温培养至菌丝刚长满平板时，测量灰霉菌菌落直径（R0）	0
对照组A	I
实验组B	加1mLBA-KA 4无菌发酵液至培养皿中	同上	同时测量灰霉菌的菌落直径（R1）	63.87%
实验组C	加1mLBA-KA 4的菌体破碎液至培养皿中	同上	同时测量灰霉菌的菌落直径（R2）	41.17%

注：PDA是马铃薯葡糖琼脂培养基的简称，抑菌率=（R一R）/R×100%

③实验结果：该菌株的无菌发酵液具有较强的抑菌活性，而细胞破碎液的抑菌活性较低，说明。

实验二：塑料被称为白色污染，黄粉虫幼虫能吃塑料，并降解其中的聚苯乙烯。我国北京航空航天大

学的科学家们通过实验进行了如下研究：

（一）、用¹³C标记的聚苯乙烯喂食黄粉虫幼虫，一段时间后，不仅检测到黄粉虫幼虫呼吸释放¹³CO₂ ， 还在黄粉虫幼虫体内检测到标记的化合物。给黄粉虫幼虫喂食庆大霉素，十天后再喂食聚苯乙烯，发现黄粉虫幼虫对聚苯乙烯的降解效率几乎为零。

（二）、将制备好的黄粉虫幼虫肠道菌悬液用①均匀涂抹在培养基平板上，将含庆大霉素、青霉素、氯霉素、四环素的圆形滤纸片置于平板上，将培养皿倒置于适宜温度的恒温箱中培养，结果显示含庆大霉素的滤纸片抑菌圈范围最大。

（三）、将黄粉虫幼虫的肠道菌悬液加入含聚苯乙烯薄片的无碳培养基（A）中培养，目的是②：待聚苯乙烯薄片明显变小、变薄时，将培养物接种到含聚苯乙烯的无碳培养基（B）中培养得到单个菌落：对菌落进行筛选、鉴定，得到对聚苯乙烯有较强降解能力的微小杆菌和金黄杆菌。回答下列问题：

（3） 实验一的结果说明聚苯乙烯可以被黄粉虫幼虫利用，作为，庆大霉素可能会（促进/抑制）黄粉虫幼虫对聚苯乙烯的吸收或利用。

（4） 实验二中，对接种用的玻璃器皿灭菌应该用法：①处使用的接种工具是。

（5） 实验三的培养基A和B中属于分离纯化微生物的培养基的是；②处所填的目的是。

（6） 由实验三的结果可知，黄粉虫幼虫能将吃进体内的塑料中的聚苯乙烯降解与直接相关。

（1） 两种蛋白质( 填“a”或 “b”) 末端的氨基酸序列相同，该末端对应的是蛋白质的(填“ -NH₂ ” 或“-COOH”)末端。a末端是引导蛋白质被运输进入叶绿体的信号肽段。

（2） 研究人员通过特定技术，将绿色荧光蛋白 (GFP) 的基因片段插入到基因X的特定位置，使表达出的蛋白质X①、X②能带有绿色荧光蛋白，以实现它们在细胞内的可视化，由此得到A系植株 (GFP基因不含启动子和终止子)。

① 根据图1，GFP基因片段应插入到基因X内字母表示的特定位置。

②GFP基因来自于水母等动物的细胞中，需先选择合适的限制酶将其从染色体DNA上切割下来。GFP基因两侧的碱基序列如图2所示，根据碱基序列应选择下表中的进行切割。

限制酶	识别序列
BamHI	G↓GATCC CCTAG↑G

HindIII	A↓AGCTT TTCGA↑A
Notl	G↓CGGCCGC CGCCGGC↑G
EcoRI	G↓AATTC CTTAA↑G

③酶切前需对GFP基因进行PCR扩增，b侧所用引物已经确定， a侧引物需在以下4种中进行选择。根据a侧序列应选择不选其他3种的理由是。在PCR仪中完成4个循环后，含有该引物的DNA片段数为个。

引物1：5'ATCCTGCTA3’

引物2：5'TATGGATCC3’

引物3：5GGATCCATA3’

引物4：5GGAAGGATA3’

（3） 研究人员在A系植株的基础上，去除产生光敏色素的基因后得到B系植株。随后，分别在黑暗条件和红光条件下培养A 、B两系植株，培养条件及观测到荧光的部位如下表所示。
表1  GFP荧光的局部部位

	发育条件
	黑暗条件	红光条件
A系植物	细胞质基质	叶绿体
B系植物	细胞质基质	细胞质基质

根据以上研究结果， A系植株对红光刺激作出应答被激活的原因是