（1） 为纯化和保存菌种，取适量一步发酵液稀释后用法接种在含有碳酸钙粉的培养基上，以（填下列选项代号）为最佳指标，分离保存菌种。

A．菌落直径大小 B．溶钙圈大小 C．溶钙圈直径与菌落直径比值

（2） 对一步发酵培养液检测发现几乎没有杂菌存在，推测可能的原因是。

（3） 二步发酵过程中大小菌的菌种数比例会影响产酸率，种液接入发酵罐前需对种液中的大小菌计数。计数所用的培养基除含有与发酵液相同的成分外，还需添加。在培养基上，可根据菌落的等特征（至少写两个）对大小菌分别计数。

（4） 某检测员将种液稀释接种了3个平板，统计假单胞杆菌的菌落数分别是30、100和200，取平均值110．该结果可信度低，原因是。

（5） 若要尝试固定化混合菌进行二步发酵生产古龙酸，应选择法进行固定。结合题意，你认为固定化混合菌操作时要注意哪些方面？（答出一点即可）。

（1） 生产果汁时，为解决果肉的出汁率低、耗时长，榨取的果汁浑浊、容易发生沉淀等问题，可以向果肉中加入果胶酶，果胶酶的作用是。制成果汁后，果汁中的酶很难回收，为了解决这一问题，可采用固定化酶或者固定化细胞技术，常用的固定方法有包埋法、。固定化酶时，通常不宜采用包埋法的原因是

（2） 橘子皮渣中含有较多的天然食用色素花色苷，可用萃取法提取。萃取效率主要取决于萃取剂的。萃取步骤依次为：皮渣→粉碎→干燥→萃取→→浓缩→花色苷。

（3） 为了解皮渣中微生物的数量，取10g皮渣加入90mL无菌水，混匀、静置后取1mL上清液，1×10⁴倍稀释后，用稀释涂布平板法分别将0.1mL菌液接种于三个培养基上。在适宜的条件下培养一段时间后，对应的三个平板中菌落数量分别为78、91和95，则每克皮渣中微生物数量为个。

（4） 皮渣堆积会积累醋酸菌，可从中筛选优良菌株。制备醋酸菌初筛平板时，需要将培养基的pH调至性。培养筛选得到的醋酸菌，在缺少糖源的液体培养基中可加入乙醇作为。

（1） 果胶和纤维素共同构成了植物细胞壁，纤维素酶是一种复合酶，它的组分包括(答出三个)。

（2） 根据测定结果，各组的出汁率可以用表示，从实验结果可以得出的结论是；

（3） 固定化黑曲霉菌使用第10次时，果胶酶对果胶(填“有”或“没有”)分解作用。

（4） 固定化黑曲霉菌不宜采用物理吸附法或化学结合法，原因是；固定过程中溶化海藻酸钠时应采用的方法，以防止焦糊。

（5） 制备固定化黑曲霉菌时，海藻酸钠能和CaCl₂反应产生海藻酸钙，而柠檬酸钠能与海藻酸钙反应，使其溶解。请你设计实验测定某凝胶珠中黑曲霉菌的活菌数，简要写出实验思路：。

（1） 图Ⅰ中用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液中的活菌数为6.8×10⁹个/L，此数值可能低于实际的活菌数，其原因是。图Ⅰ中设置甲组为对照组的目的是。

（2） 据图Ⅱ分析，丙组可能是培养的结果。丁组和乙组比较可以得出的结论是。

（3） 优良菌种可以通过实验室筛选获得，也可以通过其他方法改造获得，如（填一项即可）。

（4） 研究表明，将优良的酵母菌菌种固定化后用于发酵可以改善果酒的品质。在制备固定化酵母细胞时，常用的包埋材料是；充分混合均匀的酵母细胞溶液可在饱和溶液中形成凝胶珠。

（1） 制作过程处理压榨芝麻使用的相关酶是；若用相关酶处理芝麻，需要控制反应的温度，原因是。

（2） 为使相关酶能反复利用，常用到固定化酶技术，固定化酶一般不用方法；固定化技术常用的载体是。

（3） 某研究小组为探究相关酶处理芝麻的最适pH，在相同温度和时间内，测得在pH为5、7、9条件下降解100g芝麻所需酶量依次为3mg、1mg、5mg，则上述三个pH中，pH条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适pH，应围绕pH设计后续实验。

（4） 芝麻油含有丰富的脂肪和维生素E，脂肪和维生素E的分子式分别为C₅₇H₁₁₀O₆、C₂₉H₅₀O₂ ， 结合所学知识推测，凝胶色谱法（填“适用于”或“不适用于”）分离脂肪和维生素E，理由是。