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1. (2024高二下·衡水期中) 下列有关DNA粗提取与鉴定实验的叙述错误的是（）

A . 可用新鲜猪血代替鸡血做实验材料 B . 所得到的含DNA的黏稠物应加入到0.14mol/L的NaCl溶液中继续提纯 C . 提取含DNA的滤液可用菠菜加入一定量的洗涤剂和食盐进行研磨 D . 在含DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂，一段时间后溶液会变蓝

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1. (2024高二下·信宜月考) 基因工程中PCR扩增产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。下列关于PCR 及电泳鉴定的叙述，错误的是（）

A . PCR通过调节温度来控制DNA 双链的解聚及模板与引物的结合 B . DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度有关，与DNA分子的大小和构象无关 C . 因 DNA分子在凝胶载样缓冲液中带正电荷或负电荷，可用于电泳 D . 采用PCR技术对一个DNA进行扩增，若每个DNA分子每条链都做模板，则第n次循环共需要引物2ⁿ个

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1. (2024高三下·湛江模拟) 研究发现，若将第52位的脯氨酸（密码子为 CCA）替换成苏氨酸（密码子为 ACA），则可增强抗菌肽的抑菌性。抗菌肽基因的部分碱基序列及可供选择的引物如图1所示，箭头下方的数字代表碱基序号。现利用重叠延伸 PCR 技术对抗菌肽基因进行改造以获得抑菌性更强的抗菌肽，过程如图2所示，其中Ⅰ为转录模板链，引物上的“·”代表突变位点。改造过程中 PCR2所使用的引物组合为（）

A . 引物1和引物4 B . 引物2和引物6 C . 引物2和引物4 D . 引物3和引物5

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1. (2024高三下·湛江模拟) 研究低温条件下番茄细胞WHYI 基因对光合作用的影响，对于温度敏感型蔬菜作物的栽培具有重要的实践意义。回答下列问题：
1. （1）研究人员利用重组DNA 技术，将克隆的WHYI 基因与外源高效启动子连接，导入番茄基因组中构建WHYI 基因的过表达植株（W⁺），如图1所示。启动子是识别、结合酶的部位。若限制酶切割WHYI 基因和番茄基因组后形成相同的黏性末端（即图中Ⅰ、Ⅱ处），则会出现（答出2点）等情况，从而导致构建过表达植株的成功率下降。
3. （2） PCR 的产物一般通过电泳来鉴定，结果如图2所示。1号泳道为标准，2号泳道为阳性对照（提纯的相关蛋白基因片段），3号泳道为实验组。1 号泳道的条带实质为_，若3号泳道有杂带（非目的 DNA 片段）出现，则原因可能是（答出2 点）。
5. （3）小干扰 RNA（siRNA）能诱导特定基因转录出的 mRNA降解，导致基因沉默。研究人员据此构建了 WHYI 基因的沉默植株（W^-），siRNA 因阻图2断了过程而关闭了WHYI 基因。进一步研究发现，番茄细胞WHYI 基因影响光反应阶段 D1 蛋白（可捕捉光能）的含量，且与温度有关。研究人员用特定抗体检测D1蛋白在叶绿体内的含量，结果如表所示。该实验中的自变量为，对比三种番茄的D1蛋白含量可得到的结论是。
  温度
  25 ℃
  4℃
  植株类型
  W⁺
  W
  W^-
  W⁺
  W
  W^-
  D1 蛋白含量
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1. (2024·贵州模拟) 科学研究过程中，常需要从生物材料中分离和提取某些物质或组分。下列叙述错误的是（）

A . 小鼠成熟红细胞是提取纯净细胞膜的理想材料 B . 叶绿素a在层析液中的溶解度大于叶绿素b C . 凝胶电泳可分离DNA，差速离心可分离各种细胞器 D . DNA在酒精中溶解度较大，蛋白质几乎不溶于酒精

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1. (2024高三下·贵阳模拟) CRM1 是一种核转运蛋白，由 CRMI 基因控制产生，转运含有 NES序列的货物蛋白。科学研究发现，肿瘤细胞中CRMI 基因过度表达，含有 NES序列的肿瘤抑制因子被过量地转运至细胞质，使得它们无法在细胞核内发挥正常功能，会促进肿瘤的发生及生长。为探究CRM1的运输机制及肿瘤的治疗，科学家进行了相关研究。请回答下列问题：
1. （1）研究人员利用 PCR 技术大量扩增CRMI 基因，需要根据设计两种引物，引物的作用是。
3. （2） CRM1 C528S 是 CRM1 突变体，不具有运输能力，GST-NES 为某种肿瘤抑制因子，CRM1蛋白可能与货物蛋白的转运有关，研究人员利用上述物质设计实验进行跨膜模拟，结果发现只有③组实现了对 GST-NES 的跨膜转运，据此可推断。
  
  ①
  ②
  ③
  ④
  GST-NES
  +
  +
  +
  +
  CRM1
  -
  +
  +
  -
  RanGTP
  -
  -
  +
  +
  CRM1 C528S
  -
  -
  -
  +
  注：“+”表示有；“-”表示无。
5. （3）科学家利用计算机成功筛选出了与货物蛋白结构相似的小分子 KPT，并将其制备成抑制肿瘤细胞药物，推测KPT的作用机理是。
  请设计实验验证上述推论，写出实验思路和预期结果。（材料：肿瘤小鼠模型若干只、正常小鼠模型若干只、小分子 KPT。注：药物处理方法与肿瘤的具体检测方法不做要求）
  实验思路：。
  预期结果：。
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1. (2024高三下·云南模拟) 鸭坦布苏病毒感染鸭、鹅等多种禽类，给禽类养殖业带来严重危害。科研人员通过基因工程获取该病毒的prM蛋白用于制备单克隆抗体。为了鉴定单克隆抗体识别prM蛋白的具体区域，将prM蛋白逐步截短，分别与纯化的单克隆抗体反应，实验结果如下图（“aa”表示氨基酸，“＋”表示有反应，“－”表示无反应）。
回答下列问题。
1. （1）通过基因工程获取prM蛋白，需要利用技术快速扩增目的基因，与生物体内DNA复制相比，该技术所需酶的特殊性在于，反应过程中复性的结果是。
3. （2）用prM蛋白为抗原制备单克隆抗体，需用纯化的prM蛋白对小鼠进行免疫，其目的是获得细胞，并将该细胞与骨髓瘤细胞融合，对经选择培养的杂交瘤细胞进行培养和，多次筛选后可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，再将其注射到小鼠的腹腔内增殖、合成抗体。
5. （3）根据图示实验结果分析，该单克隆抗体识别prM蛋白的区域大概为（填“40~50”“40~55”或“40~60”）位氨基酸。
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1. (2024高三下·西山模拟) 多不饱和脂肪酸（PUFAs）是人体必需脂肪酸，为解决猪肉中PUFAs含量不足的问题，研究者从线虫中获得控制PUFAs合成的必需酶基因fat1，培育转fat1基因猪，操作过程如图所示。图中GFP基因表达出绿色荧光蛋白。看图回答下列问题：
1. （1）用PCR技术在体外扩增目的基因时，PCR扩增仪中要加入缓冲液、目的基因、（至少答两点）等。
3. （2）从图中可知，在构建基因表达载体时，为克服目的基因自身环化，即线性DNA的末端相互连接，变圆环，以及便于目的基因与载体的连接，切割含目的基因的DNA和载体的限制酶应选用和。
5. （3）构建的基因表达载体中，GFP基因的作用是。除GFP基因外，未标注出的必需元件还有。
7. （4）猪成纤维细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期，以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，需要分瓶再继续培养，分瓶后的培养过程称为，操作时首先用处理成细胞悬液。
9. （5）经检测，fat1基因成功整合在猪基因组DNA后，（填“能”或“不能”）说明成功培育转基因猪，理由是。
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1. (2024高二下·仁寿期中) THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述正确的是（）
EcoRⅠ
BamHⅠ
KpnⅠ
MfeⅠ
HindⅢ

A . 若采用PCR技术对一个THP9基因进行扩增，则第n代复制共需要引物2ⁿ-1个 B . 构建基因表达载体时，用MfeⅠ、HindⅢ切割质粒，用EcoRⅠ、HindⅢ切割目的基因 C . 利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物1和引物4 D . PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Mg²⁺用于激活RNA聚合酶

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1. (2024高二下·仁寿期中) 在利用洋葱进行“DNA的粗提取和鉴定”的实验中，相关操作正确的是（）

A . 研磨洋葱时，加入适量的研磨液瓦解细胞膜，充分释放核DNA B . 利用定性滤纸进行过滤，以去除杂质，提高DNA的含量和纯度 C . 向DNA滤液中加入等体积、预冷的50%酒精，以获得DNA粗提物 D . 将白色丝状物加入4mL二苯胺试剂中沸水浴，以利于发生颜色反应

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