【实验目的】比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性.
【实验原理】纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖,用葡萄糖的产生速率表示酶活性大小;用呈色反应表示葡萄糖的生成量.
【实验材料】三种微生物(A、B、C)培养物的纤维素酶提取液,提取液中酶蛋白浓度相同.
【实验步骤】
(1)取四支试管,分别编号.
(2)按照如表所列添加相应试剂.
试管号 试剂(mL) | 1 | 2 | 3 | 4 |
蒸馏水 | 1.4 | 1.4 | 1.4 | X |
pH7.5的缓冲液 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
纤维素悬浮液 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
微生物A提取液 | 0.1 | |||
微生物B提取液 | Y | |||
微生物C提取液 | 0.1 |
(3)将上述四支试管放入37℃的水浴,保温1小时.
(4)检验葡萄糖的生成量,在上述四支试管中分别加入 ,摇匀后,进行水浴加热.
(5)观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色深浅.
【实验结果】
1 | 2 | 3 | 4 | |
颜色深浅程度 | + | +++ | ++ | ﹣ |
【分析讨论】
①表格中实验添加试剂的量X、Y分别是 、 .
②该实验中的对照组是 号试管,实验的自变量是 ,因变量是 , 无关变量是 (至少3个)
③实验组试管均呈现的颜色是 ,但深浅不同.
④将上述四支试管放入37℃的水浴,保温目的
⑤你认为上述三种微生物中,最具有应用开发价值的是微生物 .
红细胞是脊椎动物体内通过血液运送氧气的最主要的媒介,含有大量的血红蛋白时,我们可以选用动物的血液来提取和分离血红蛋白,请回答下列有关问题:
①a、b均为蛋白质分子,其中先从层析柱中洗脱出来的是 ,原因是
.
②装填凝胶色谱柱时,色谱柱内不能有气泡存在,原因是 .
【实验目的】比较甲、乙、丙三种微生物所产生的淀粉酶的活性.
【实验材料】科研人员提供的三种微生物淀粉酶提取液(提取液中酶浓度相同)等.
试管1 | 试管2 | 试管3 | 试管4 | |
蒸馏水 | 2 | 2 | 2 | A |
pH=8缓冲液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
淀粉溶液 | 1 | 1 | 1 | 1 |
甲生物提取液 | 0.3 | |||
乙生物提取液 | 0.3 | |||
丙生物提取液 | 0.3 | |||
总体积 | 3.8 | 3.8 | 3.8 | B |
【实验步骤】
(1)取四支试管,分别编号,按下表要求完成操作(表中各溶液的体积单位为mL)
(2)将上述四支试管放入37℃的水浴,保温10min.
(3)在上述四支试管冷却后滴入碘液.
(4)观察比较四支试管的颜色及其深浅.
【实验结果】(“+”表示颜色变化的深浅,“﹣”表示不变色)
试管1 | 试管2 | 试管3 | 试管4 | |
颜色深浅程度 | ++ | ﹣ | + | C |
回答相关问题:
【实验目的】比较甲、乙、丙三种微生物所产生的淀粉酶的活性
【实验原理】略.
【实验材料】科研人员提供的三种微生物淀粉酶提取液(提取液中酶浓度相同)等
【实验步骤】
(1)取四支试管,分别编号.
(2)在下表各列的字母位置,填写相应试剂的体积量(mL),并按表内要求完成操作.
试管1 | 试管2 | 试管3 | 试管4 | |
蒸馏水 | 2 | 2 | 2 | A |
pH=8缓冲液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
淀粉溶液 | 1 | 1 | 1 | 1 |
甲生物提取液 | 0.3 | |||
乙生物提取液 | 0.3 | |||
丙生物提取液 | 0.3 | |||
总体积 | 3.8 | 3.8 | 3.8 | B |
(3)将上述四支试管放入37℃的水浴,保温1小时.
(4)在上述四支试管冷却后滴入碘液.
(5)观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅.
【实验结果】(“+”表示颜色变化的深浅,“﹣”表示不变色)
试管1 | 试管2 | 试管3 | 试管4 | |
颜色深浅程度 | ++ | ﹣ | + | C |
请回答下列问题:
主要试剂及仪器:麦芽糖标准液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等.
实验步骤:
步骤一:制作麦芽糖梯度液.取7支干净的具塞刻度试管,编号,按表加入试剂,再将试管置于60℃水浴中加热2min,取出后按试管号顺序排列.
试剂 | 试管号 | ||||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | |
麦芽糖标准液(mL) | 0 | 0.2 | 0.6 | 1.0 | 1.4 | 1.6 | 2.0 |
蒸馏水(mL) | 2.0 | 1.8 | 1.4 | 1.0 | X | Y | Z |
斐林试剂(mL) | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
步骤二:萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液.
步骤三:将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15min,取出后迅速冷却.
步 骤四:另取四支试管,编号A、B、C、D,向A、B试管中各加5mL5%淀粉溶液,向C、D试管中分别加入2mL已经处理的酶溶液(忽略其中含有的少量麦 芽糖)和蒸馏水,将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10min,然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温 10min.
步骤五:取A、B试管中反应溶液各2mL分别加入E、F试管,然后向E、F试管分别加入 , , 观察颜色变化.
结果分析:将E试管中颜色与步骤一中获得的麦芽糖标准液进行比较,获得该试管中麦芽糖浓度,并计算出α﹣淀粉酶催化效率.
请分析回答:
试管1 | 试管2 | 试管3 | 试管4 | ||
实 验 操 作 | 蒸馏水(mL) | 2 | 2 | 2 | A |
pH=8缓冲液(mL) | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | |
淀粉溶液(mL) | 1 | 1 | B | 1 | |
甲生物提取液(mL) | C | ||||
乙生物提取液(mL) | D | ||||
丙生物提取液(mL) | E | ||||
37℃的水浴,保温1小时 | |||||
总体积(mL) | 3.8 | 3.8 | 3.8 | 3.8 | |
滴加等量的碘液 | |||||
实验结果 | 颜色深浅程度 | ++ | ﹣ | + | F |
注:“+”显色,“+”越多显色越深;“﹣”不显色 |
实验目的:比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性.
实验材料:三种微生物(A~C)培养物的纤维素酶提取液,提取液中酶蛋白浓度相同.
实验步骤:
(1)取四支试管,分别编号.
(2)在下表各列的英文字母位置,填写相应试剂的体积量,并按表内要求完成相关操作.
试管号 | 1 | 2 | 3 | 4 |
蒸馏水 | 1.4 | 1.4 | 1.4 | A |
pH7.5的缓冲液 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
纤维素悬浮液 | 0.3 | 0.3 | B | 0.3 |
微生物A提取液 | 0.1 | |||
微生物B提取液 | C | |||
微生物C提取液 | 0.1 |
(3)将上述四支试管放入37℃的水浴,保温1小时.
(4)在上述四支试管中分别加入等量本尼迪特试剂摇匀,在沸水浴中煮沸2﹣3min
(5)观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅.
实验结果:
试管号 | 1 | 2 | 3 |
添加提取液 | 微生物A提取物 | 微生物B提取物 | 微生物C提取物 |
颜色深浅程度 | + | +++ | ++ |
分析讨论:
(1)该实验中的自变量是 ,因变量 , 因变量的呈现方法是 .
(2)上述结果表明:不同来源的纤维素酶,虽然酶蛋白浓度相同,但活性不同.若不考虑酶的最适pH和最适温度的差异,仅从酶结构上考虑,原因有 .
(3)你认为上述三种微生物中,最具有应用开发价值的是 .
石油降解酶去醛基后变为石化酶,这两种酶都能催化污泥中石油的分解.
(1)验证石化酶化学本质所用的试剂名称是 , 酶催化作用的机理是 .
(2)下图为不同条件下,石油降解酶对某湖泊污泥中石油分解能力的测定结果.
①本实验的自变量为 ,若要比较石油分解酶及石化酶催化能力的大小可观测的指标是 .
②湖泊中能合成石油分解酶的细菌可消除轻微石油污染,细菌内合成和分泌分解酶的细胞器有
(3)通过预实验得知两种酶的适宜温度在20~30℃之间,为进一步探究两种酶的最适温度及催化能力,某同学以2℃为温度梯度设计了如下的实验记录表格.
探究石油降解酶及石化酶的最适温度和催化能力实验记录表
温度 2天后石油含量(g/kg污泥) 酶 | |||||
石油降解酶 |
指出表中的三处错误
①
②
③ .
如图1是某课题组的实验结果(注:A酶和B酶分别是两种微生物分泌的纤维素酶).请回答下列问题:
(1)据图1可知,本实验研究的课题是 .
(2)据图1,在40℃至60℃范围内,热稳定性较好的酶是 .高温条件下,酶容易失活,其原因是 .
(3)下表是图一所示实验结果统计表,由图1可知表中③处应是 ,⑧处应是 .
温度(℃) | ① | ② | ③ | ④ | ⑤ | ⑥ | ⑦ |
A酶活性(mmol•S﹣1) | 3.1 | 3.8 | 5.8 | 6.3 | 5.4 | 2.9 | 0.9 |
B酶活性(mmol•S﹣1) | 1.1 | 2.2 | 3.9 | ⑧ | 3.4 | 1.9 | 0 |
(4)图2表示30℃时B酶催化下的反应物浓度随时间变化的曲线,其他条件相同,在图2上画出A酶(浓度与B酶相同)催化下的反应物浓度随时间变化的大致曲线 .
(5)适宜条件下,取一支试管加入A酶和蛋白酶溶液并摇匀,一段时间后加入纤维素,几分钟后加入新制斐林试剂并水浴加热,结果试管中没有产生砖红色沉淀,原因是 .