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当前位置: 高中生物学 / 生物技术实践 / 酶的应用 / 酶活力测定的一般原理和方法
  • 1. 萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强,主要有α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶.α﹣淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β﹣淀粉酶不耐热,在70℃条件下15min后失活.实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1cm).

    主要试剂及仪器:麦芽糖标准液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等.

    实验步骤:

    步骤一:制作麦芽糖梯度液.取7支干净的具塞刻度试管,编号,按表加入试剂,再将试管置于60℃水浴中加热2min,取出后按试管号顺序排列.

    试剂

    试管号

    1

    2

    3

    4

    5

    6

    7

    麦芽糖标准液(mL)

    0

    0.2

    0.6

    1.0

    1.4

    1.6

    2.0

    蒸馏水(mL)

    2.0

    1.8

    1.4

    1.0

    X

    Y

    Z

    斐林试剂(mL)

    2.0

    2.0

    2.0

    2.0

    2.0

    2.0

    2.0

    步骤二:萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液.

    步骤三:将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15min,取出后迅速冷却.

    步 骤四:另取四支试管,编号A、B、C、D,向A、B试管中各加5mL5%淀粉溶液,向C、D试管中分别加入2mL已经处理的酶溶液(忽略其中含有的少量麦 芽糖)和蒸馏水,将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10min,然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温 10min.

    步骤五:取A、B试管中反应溶液各2mL分别加入E、F试管,然后向E、F试管分别加入          ,                           , 观察颜色变化.

    结果分析:将E试管中颜色与步骤一中获得的麦芽糖标准液进行比较,获得该试管中麦芽糖浓度,并计算出α﹣淀粉酶催化效率.

    请分析回答:


    1. (1) 本实验的目的是测定 .

    2. (2) 步骤一的5~7试管中加入蒸馏水的量(X、Y、Z)分别是  、  (单位mL);该步骤的作用是

    3. (3) 实验中B试管所起的具体作用是 .

    4. (4) 请补全步骤五的做法 ,  .

    5. (5) 若要测定另一种淀粉酶的活性,则需在步骤 进行改变.