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1. (2023高二下·白山期末) 科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。下列说法错误的是（）

A . 将目的基因转入小鼠细胞前，应先将人的生长激素基因与农杆菌的T-DNA结合 B . 将含有人的生长激素基因的载体导人小鼠受精卵 C . 人的生长激素基因存在于小鼠的绝大多数细胞中 D . 采用PCR技术检测人的生长激素基因是否插入了小鼠的基因组

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1. (2023高二下·白山期末) 下列不属于利用基因工程技术生产药物的是（）

A . 从酵母菌体内获得干扰素 B . 从奶牛乳腺分泌的牛奶中获得人胰岛素 C . 从大肠杆菌体内获得白细胞介素 D . 从毛霉菌体内获得蛋白酶和脂肪酶

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1. (2023高二下·白山期末) 下列不属于传统发酵技术的是（）

A . 利用葡萄自然发酵制作葡萄酒 B . 利用毛霉发酵制作腐乳 C . 利用乳酸菌发酵制作泡菜 D . 利用青霉菌的培养大量生产青霉素

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1. (2023高二下·舟山期末) 火龙果在低温下幼嫩茎段会部分受到伤害，脂质转移蛋白（LTPs）被证实在植物抵抗低温胁迫中有重要作用，控制该蛋白合成的基因结构如图1所示。某课题研究组将LTP基因导入火龙果愈伤组织，以获得抗寒能力强的火龙果。回答下列问题：
1. （1）采用PCR技术克隆LTP基因时，为使目的基因能与图2所示的载体准确连接，将NcoI和BstEII两种限制酶的识别序列分别添加在引物、引物（填引物编号）的（填“3'端”或“5'端”）。
3. （2）将构建的表达载体与经处理获得的感受态根癌农杆菌混合，通过液体悬浮培养完成和细胞复苏，再将菌液涂布在含的培养基上培养，挑取单菌落进行PCR鉴定，以获得的根癌农杆菌。
5. （3）从田间取得的火龙果茎段经处理后，诱导其形成愈伤组织，加入（2）中获得的根癌农杆菌共同培养，再转入含抗生素的培养基，此时添加抗生素的主要目的是。
7. （4）经上述处理后的愈伤组织放入含X一Gluc的选择培养基中培养，选取色的愈伤组织，继续培养得到幼苗。为进一步确定该幼苗中的LTP基因是否表达，从转基因细胞中提取蛋白质，经处理固定在硝酸纤维素膜上，让待测蛋白质与发生抗原抗体杂交。除分子水平的检测方法外，还可以用。
  
  （注：图1箭头表示目的基因的转录方向；图2：NcoI和BstEII为不同限制酶的识别位点；T-DNA中标出的启动子属于真核细胞表达系统；GUS基因编码产生的β-葡萄糖苷酸酶能将无色物质X-Gluc分解，使植物组织呈蓝色，否则为白色）
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1. (2023高二下·玉溪期末) 阅读如下资料，判断下列各项描述不合理的是（）
资料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”。
资料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。

A . 甲属于基因工程，乙属于蛋白质工程 B . 甲中将目的基因导入小鼠受精卵中常用显微注射法 C . 乙中通过对基因改造实现了对蛋白质的改造 D . 从资料乙可看出，T4溶菌酶是一种直接利用氨基酸制造出来的新蛋白质

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1. (2023高二下·南宁期末) 科学家通过基因工程，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉。其过程大致如图所示：
1. （1）从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因，需要用到的工具是，可采用技术对Bt毒蛋白基因进行大量扩增。
3. （2）基因表达载体的组成有Bt毒蛋白基因、启动子、终止子以及等，启动子是识别和结合的部位。
5. （3）用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上有，它能将Bt毒蛋白基因整合到棉花细胞的上。
7. （4）检测Bt毒蛋白基因在抗虫棉中是否成功表达，在分子水平上的检测方法是。
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1. (2023高二下·吉林期末) 某研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药用蛋白含量提高了30多倍。下列有关叙述正确的是（）

A . 转基因动物是指体细胞中出现了新基因的动物 B . 提高基因的表达水平是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因 C . 只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中是纯合的 D . 转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，故不能合成人白蛋白

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1. (2023高二下·长春期末) 对微生物或动物的细胞进行基因改造，使它们能够生产药物，是目前基因工程取得实际应用成采非常多的领域，如用大肠杆菌生产人的干扰素，将药用蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起，构建乳腺生物反应器。下列说法正确的是（）

A . 干扰素是具有干扰病毒复制作用的糖蛋白 B . 经发酵产生的干扰素属于大肠杆菌的次生代谢物 C . 用显微注射法将基因表达载体导入哺乳动物的乳腺细胞构建乳腺生物反应器 D . 乳腺反应器的局限是只适用雌性动物的哺乳期

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1. (2023高一下·深圳期末) 研究人员将人溶菌酶基因转入小鼠受精卵，从该受精卵发育而成的雌鼠的乳汁中，获得大量的人溶菌酶。下列叙述错误的是（）

A . 该雌鼠的卵原细胞中含有人溶菌酶基因 B . 该雌鼠分泌的乳汁中含有人溶菌酶基因 C . 人溶菌酶基因可在该雌鼠乳腺细胞中表达 D . 人和鼠mRNA上CUU密码子决定的氨基酸种类相同

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1. (2023高二下·南山期末) 科研人员获取了PHB2蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），利用基因工程的方法使大肠杆菌表达该蛋白，以便进一步检测PHB2蛋白抑制肿瘤细胞增殖和扩散的效果。下图1是phb2基因编码区序列以及两端需添加的、能被相关酶识别的序列，图2为研究所用表达载体示意图，表格为有关的限制酶种类及识别序列和切割位点。回答下列问题：

限制酶种类	SpeⅠ	PvitⅡ	BamHⅠ	XbaⅠ
识别序列	5'A^↓CTAGT3′	5'CAG^↓CTG3′	5'G^↓GATCC3′	5'T^↓CTAGA3′

（1）在利用PCR扩增phb2基因时，为了使PCR产物能被限制酶切割，以便构建基因表达载体，可以考虑在
引物的（填“3’端”或“5'端”）添加限制酶识别序列。据图可推断，扩增α链时需添加的限制酶识别序列以及所用引物的碱基序列是5'3'。已知AUG为PHB2蛋白合成的起始密码子，则构建符合要求的表达载体所用的工具酶有PvitI、。
（2）将符合要求的基因表达载体导入工程菌后，可用技术检测PHB2蛋白是否合成，通过提取、分离和纯化，从发酵液中获得该蛋白。为防止PHB2蛋白在工程菌细胞中被降解，在发醉过程中应选用缺陷型工程菌作为受体细胞，且在发酵结束后的纯化过程中应添加蛋白酶抑制剂。
（3）肿瘤细胞通常培养在（气体及比例）的恒温培养箱中，将适量PHB2蛋白加入培养液后，若肿瘤细胞，则表明该蛋白具有抑制肿瘤细胞增殖和扩散作用，据此可进一步地深入研究。

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