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1. (2024高二下·封开期中) 下列关于“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述中，正确的是( )

A . 用鸡血作为材料，原因是鸡血红细胞有细胞核，其他动物红细胞没有细胞核 B . 用不同浓度的NaCl溶液进行DNA粗提取，原因是DNA在其中溶解度不同 C . 用酒精进行提纯，原因是DNA溶于酒精，蛋白质不溶于酒精 D . 用二苯胺试剂进行鉴定，原因是DNA溶液中加入二苯胺试剂即呈蓝色

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1. (2024·广西模拟) 葡萄酒中的氨基甲酸乙酯（EthylCarbamate，EC）是一种潜在致癌物，主要由尿素和乙醇反应生成。通过在亲本酿酒酵母菌株中，敲除一个拷贝的精氨酸酶基因CAR1，同时选用强启动子PGK1过表达脲基酰胺酶基因DUR1、2，来获得低产EC的重组酿酒酵母菌株。与亲本菌株相比，重组酿酒酵母菌株发酵性能及风味物质不受影响，尿素和EC的含量分别降低了40.38%和34.45%。满足葡萄酒相关领域对酵母的较高要求，有广泛的应用前景。
1. （1）下图为目的基因脲基酰胺酶基因DUR1、2的部分序列：
  模板链3'-TACTGTCAATCA……ATGACGGCCACT-5'
  编码链5'-ATGACAGTTAGT……TACTGCCGGTGA-3'
  利用PCR扩增目的基因应选择的一对引物是____。
3. （2）如图所示，构建基因表达载体时为避免反向拼接应选择（填写酶的具体名称）识别并切割质粒，再用DNA连接酶连接。氨苄青霉素抗性基因的作用是。
5. （3）已知目的基因上无相关酶切位点，应在引物的（填5'或3'）端设计酶切序列，目的基因上游设计的酶切序列+引物序列为5'--3'。
7. （4）已知DUR1、2基因的转录模板链为A链，如果采用一定方法将目的基因与质粒进行反向连接，构建出反义DUR1、2基因，则其转录模板链为链。将其导入之前的转基因工程菌中，其结果无法获得低EC产品，推测其原因可能是。
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1. (2024高三下·广西模拟) 研究发现，成年小鼠的Y染色体上双外显子SRY（SRY-T）才是真正的睾丸决定因素。缺少SRY-T的雄性小鼠（XY）发育为雌性，而携带SRY-T转基因的雌性小鼠（XX）发育为雄性。请回答问题：
1. （1）要确定从Y染色体上获得的DNA片段中是否含有SRY-T，先获得相应DNA片段并进行PCR扩增，扩增时需要种引物。PCR扩增过程中温度呈“升温→降温→升温”的周期性变化，“降温”的作用是。对扩增产物进行检测时用作为探针，若出现杂交带，则（填“含有”或“不含有”）SRY-T基因。
3. （2）图为验证SRY-T能决定雄性性别的实验过程，将含SRY-T的基因表达载体导入小鼠（性染色体为XX）体内，导入雄原核的原因是。
5. （3）植入代孕母鼠的小鼠早期胚胎性染色体需要为XX，可检测囊胚期细胞进行筛选。进行胚胎移植时代孕母鼠是（答出2点即可）的个体。在获得的子代小鼠中出现（填“雄性”或“雌性”）小鼠，证明SRY-T基因决定雄性性别。
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1. (2024高二下·高州期中) 科学家提取苏云金杆菌的Bt抗虫蛋白基因导入棉花细胞，成功培育出转基因抗虫棉。下列叙述错误的是（）

A . 将Bt基因导入棉花细胞采用我国科学家独创的花粉管通道法 B . Bt抗虫蛋白能破坏鳞翅目昆虫的消化系统与其碱性环境有关 C . Bt基因能在棉花中表达说明细菌和棉花共用一套遗传信息 D . PCR扩增Bt基因时，反应缓冲液中一般要添加Mg²⁺来激活耐高温的DNA聚合酶

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1. (2024高二下·衡水期中) 下列有关DNA粗提取与鉴定实验的叙述错误的是（）

A . 可用新鲜猪血代替鸡血做实验材料 B . 所得到的含DNA的黏稠物应加入到0.14mol/L的NaCl溶液中继续提纯 C . 提取含DNA的滤液可用菠菜加入一定量的洗涤剂和食盐进行研磨 D . 在含DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂，一段时间后溶液会变蓝

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1. (2024高二下·信宜月考) 基因工程中PCR扩增产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。下列关于PCR 及电泳鉴定的叙述，错误的是（）

A . PCR通过调节温度来控制DNA 双链的解聚及模板与引物的结合 B . DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度有关，与DNA分子的大小和构象无关 C . 因 DNA分子在凝胶载样缓冲液中带正电荷或负电荷，可用于电泳 D . 采用PCR技术对一个DNA进行扩增，若每个DNA分子每条链都做模板，则第n次循环共需要引物2ⁿ个

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1. (2024高三·茂名模拟) 生物学的发展离不开技术的支持，下列叙述错误的是（）

A . 放射性同位素标记技术可用于证明光合作用释放的氧来自水 B . DNA分子杂交技术可用于两种生物亲缘关系的判断 C . PCR技术可用于目的基因分子水平的检测 D . 离心技术可用于证明DNA的半保留复制

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1. (2024高三下·湛江模拟) 研究发现，若将第52位的脯氨酸（密码子为 CCA）替换成苏氨酸（密码子为 ACA），则可增强抗菌肽的抑菌性。抗菌肽基因的部分碱基序列及可供选择的引物如图1所示，箭头下方的数字代表碱基序号。现利用重叠延伸 PCR 技术对抗菌肽基因进行改造以获得抑菌性更强的抗菌肽，过程如图2所示，其中Ⅰ为转录模板链，引物上的“·”代表突变位点。改造过程中 PCR2所使用的引物组合为（）

A . 引物1和引物4 B . 引物2和引物6 C . 引物2和引物4 D . 引物3和引物5

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1. (2024高三下·湛江模拟) 研究低温条件下番茄细胞WHYI 基因对光合作用的影响，对于温度敏感型蔬菜作物的栽培具有重要的实践意义。回答下列问题：
1. （1）研究人员利用重组DNA 技术，将克隆的WHYI 基因与外源高效启动子连接，导入番茄基因组中构建WHYI 基因的过表达植株（W⁺），如图1所示。启动子是识别、结合酶的部位。若限制酶切割WHYI 基因和番茄基因组后形成相同的黏性末端（即图中Ⅰ、Ⅱ处），则会出现（答出2点）等情况，从而导致构建过表达植株的成功率下降。
3. （2） PCR 的产物一般通过电泳来鉴定，结果如图2所示。1号泳道为标准，2号泳道为阳性对照（提纯的相关蛋白基因片段），3号泳道为实验组。1 号泳道的条带实质为_，若3号泳道有杂带（非目的 DNA 片段）出现，则原因可能是（答出2 点）。
5. （3）小干扰 RNA（siRNA）能诱导特定基因转录出的 mRNA降解，导致基因沉默。研究人员据此构建了 WHYI 基因的沉默植株（W^-），siRNA 因阻图2断了过程而关闭了WHYI 基因。进一步研究发现，番茄细胞WHYI 基因影响光反应阶段 D1 蛋白（可捕捉光能）的含量，且与温度有关。研究人员用特定抗体检测D1蛋白在叶绿体内的含量，结果如表所示。该实验中的自变量为，对比三种番茄的D1蛋白含量可得到的结论是。
  温度
  25 ℃
  4℃
  植株类型
  W⁺
  W
  W^-
  W⁺
  W
  W^-
  D1 蛋白含量
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1. (2024·贵州模拟) 科学研究过程中，常需要从生物材料中分离和提取某些物质或组分。下列叙述错误的是（）

A . 小鼠成熟红细胞是提取纯净细胞膜的理想材料 B . 叶绿素a在层析液中的溶解度大于叶绿素b C . 凝胶电泳可分离DNA，差速离心可分离各种细胞器 D . DNA在酒精中溶解度较大，蛋白质几乎不溶于酒精

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