1. 葡萄酒中的氨基甲酸乙酯（EthylCarbamate，EC）是一种潜在致癌物，主要由尿素和乙醇反应生成。通过在亲本酿酒酵母菌株中，敲除一个拷贝的精氨酸酶基因CAR1，同时选用强启动子PGK1过表达脲基酰胺酶基因DUR1、2，来获得低产EC的重组酿酒酵母菌株。与亲本菌株相比，重组酿酒酵母菌株发酵性能及风味物质不受影响，尿素和EC的含量分别降低了40.38%和34.45%。满足葡萄酒相关领域对酵母的较高要求，有广泛的应用前景。

1. （1） 下图为目的基因脲基酰胺酶基因DUR1、2的部分序列：

   模板链3'-TACTGTCAATCA……ATGACGGCCACT-5'

   编码链5'-ATGACAGTTAGT……TACTGCCGGTGA-3'

   利用PCR扩增目的基因应选择的一对引物是____。

   A . 5'-TACTGCCGGTGA-3' B . 5'-ATGACAGTTAGT-3' C . 5'-TCACCGGCAGTA-3' D . 5'-ACTAACTGTCAT-3'
3. （2） 如图所示，构建基因表达载体时为避免反向拼接应选择（填写酶的具体名称）识别并切割质粒，再用DNA连接酶连接。氨苄青霉素抗性基因的作用是。
5. （3） 已知目的基因上无相关酶切位点，应在引物的（填5'或3'）端设计酶切序列，目的基因上游设计的酶切序列+引物序列为5'--3'。
7. （4） 已知DUR1、2基因的转录模板链为A链，如果采用一定方法将目的基因与质粒进行反向连接，构建出反义DUR1、2基因，则其转录模板链为链。将其导入之前的转基因工程菌中，其结果无法获得低EC产品，推测其原因可能是。