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1. (2024高二下·南湖月考) 科学家将HPV16（人乳头瘤病毒）Ll基因导入烟草，利用转基因烟草作为生物反应器，生产出纯度较高的HPV16的L1蛋白。请回答：
1. （1）获得转基因烟草的核心是，该过程用两种酶进行酶切的优点是。
3. （2）可利用农杆菌侵染切割的烟草叶片，切割的目的是。
5. （3）与发芽培养基相比，配制转基因丛状苗生根培养基时，可根据实际情况适当添加，促进丛状苗基部细胞分裂形成愈伤组织，并进一步分化形成，最终形成根。
7. （4）经培养获得具有新性状的再生植株。提取再生植株的DNA，采用扩增相关基因，来鉴定遗传物质是否成功重组。也可以用法检测再生植株是否表达出相应的L1蛋白。
9. （5）利用转基因烟草植株生产的L1蛋白在医学或生物工程领域的用途：。（写出1项即可）
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1. (2024高二下·南湖月考) “筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列叙述正确的是（　　）

A . 基因工程中通过标记基因筛选出的细胞一定都含有重组质粒 B . 在诱变育种中需要通过筛选才能得到数量较多的有利变异 C . 植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的杂种细胞需进行筛选 D . 单克隆抗体制备过程中对杂交瘤细胞进行一次抗体检验即可大量获得阳性细胞克隆

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1. (2024高二下·南湖月考) 下列有关基因工程基本操作程序的叙述，正确的是（）

A . 目的基因检测时所用的核酸探针是指与目的基因相同的特定双链DNA B . 基因组文库的基因含有某物种的部分基因 C . 若基因比较小且核苷酸序列已知，则可直接通过化学方法合成 D . 抗生素合成基因作为标记基因，可鉴别目的基因是否导入受体细胞

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1. (2024高二下·东莞月考) 如图表示构建重组质粒和筛选含人胰岛素原基因的细菌的过程，其中I和II表示抗性基因，①—⑦表示过程，其它数字表示菌落。下列有关叙述正确的是（）
（注：⑦过程表示用灭菌绒布从含氨苄青霉素培养基中蘸取菌种，再按到含四环素培养基中培养）

A . ①②只能用同一种限制性核酸内切酶进行切割 B . I表示抗氨苄青霉素基因，II表示抗四环素基因 C . 3、5菌落是筛选出的含有人胰岛素原基因的细菌 D . 该基因工程成功的标志是细菌合成具有生物活性的胰岛素

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1. (2024高二下·常平期中) 炎症性肠病（IBD）是一种易导致结肠癌的慢性疾病，患者肠道内会产生硫代硫酸盐。科研人员以小鼠为研究对象，建立了下图所示的炎症性肠病检测模型，GFP基因是绿色荧光蛋白基因。
1. （1）据图分析，可以通过检测荧光强弱来判定小鼠肠道内硫代硫酸盐的浓度，其原因是。
3. （2）研究者利用基因工程技术构建含硫代硫酸盐检测传感器的大肠杆菌工程菌，通过PCR扩增R基因时应该选择的引物是，在A、B两端引物的5^'端需添加的限制酶识别序列为和。
  限制酶识别序列和酶切位点如下表：
  限制酶
  HindⅢ
  BamHⅠ
  PstⅠ
  EcoRⅠ
  BglⅡ
  识别序列（5^'→3^'）
  A↓AGCTT
  G↓GATCC
  C↓TGCAG
  G↓AATTC
  A↓GATCT
5. （3）研究发现患者肠道内硫代硫酸盐的生成量与疾病严重程度呈正相关。为简化疾病诊断和精确用药，科研人员开发了智能工程菌。科研人员将抗炎蛋白基因与硫代硫酸盐特异性诱导激活的启动子P连接，构建出下图所示表达载体（部分片段），导入用处理的大肠杆菌细胞内，选用启动子P的优点是。
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1. (2024高二下·惠城期中) 抗凝血酶Ⅲ是一种药用蛋白，对预防和治疗静脉血栓、心肌梗死、脑血管病变具有重要作用。为了提高抗凝血酶Ⅲ的产量，科研人员设计利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备抗凝血酶Ⅲ，并获得了成功。制作崂山奶山羊乳腺生物反应器的流程如图1所示。回答下列问题：
1. （1）获取了抗凝血酶Ⅲ基因后，需要通过PCR技术对该基因进行扩增，扩增的原理是，扩增抗凝血酶Ⅲ基因的过程中一般不需要使用解旋酶，原因是。
3. （2）构建基因表达载体时，需要将抗凝血酶Ⅲ基因插入到启动子与之间，其中启动子的作用是。
5. （3）获取重组质粒后，将重组质粒导入受精卵。从崂山奶山羊A的卵巢中获取卵子和从崂山奶山羊B的睾丸中获取精子，其中精子要进行处理才具备受精的能力。图1中步骤④常用的方法是。
7. （4）科研人员通过实验获得三只转基因奶山羊D（甲、乙、丙）。科研人员对甲、乙、丙三只奶山羊和非转基因奶山羊进行了基因检测。检测结果显示非转基因奶山羊体内无抗凝血酶Ⅲ基因，甲、乙、丙三只奶山羊体内均含有抗凝血酶Ⅲ基因。进一步检测抗凝血酶Ⅲ的表达情况，结果如图2所示。
  注：图中黑色条带为抗原—抗体杂交带，表示相应蛋白质的存在。M泳道条带为相应标准蛋白所在位置。根据以上信息分析，该检测结果说明。
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1. (2024高二下·惠城期中) 菊花是一种双子叶植物，易感桃蚜而影响植物生长。某科研团队获得了转GNA基因（表达产物能有效抑制桃蚜生长）菊花，流程如图所示。下列相关叙述错误的是（）

A . 过程a、b分别表示逆转录和 PCR，可获得大量 GNA基因 B . 图中用到的Ti质粒是取自土壤中农杆菌的一种天然质粒 C . 图中c过程需要将GNA基因插入到 Ti质粒的T-DNA中 D . 通过桃蚜接种实验可以检测图中菊花植株对桃蚜的抗性

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1. (2024高二下·惠城期中) 某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp)，先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关说法错误的（）
a酶切割产物(bp)
b酶再次切割产物(bp)
2100： 1400： 1000： 500
1900： 200： 800： 600： 1000： 500

A . 限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的 B . a酶与b酶切割后形成的黏性末端不相同 C . a酶与b酶切断的化学键都是磷酸二酯键 D . 在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个

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1. (2024高二下·惠城期中) 限制酶Mun I和限制酶EcoRI的识别序列及其切割位点分别如下：-C↓AATTC-和-G↓AATTC-，下图表示某一目的基因片段与质粒拼接形成重组质粒的过程，下列相关叙述错误的是（）

A . 限制酶作用于特定位点的磷酸二酯键 B . 每一种限制酶只能识别双链DNA 的特定核苷酸序列 C . 限制酶MunI和限制酶EcoRI切割后形成的黏性末端的碱基可以互补配对 D . 为了能够将目的基因拼接到质粒上，应同时用以上2种限制酶切割质粒

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1. (2024高二下·信宜期中) 2022年8月，九价HPV疫苗的使用人群扩展到9~45岁适龄女性。研究发现，人类99.7%的宫颈癌是由人乳头瘤病毒（HPV）持续感染引起的。科研人员将HPV病毒表面L1衣壳蛋白基因构建重组质粒，导入大肠杆菌制备HPV疫苗，过程如下图所示。请回答下列问题：
1. （1）构建重组质粒之前，可利用PCR技术扩增L1基因，此时需要在反应体系中添加的有机物有、、模板DNA和dNTP等。图b的启动子的作用是。
3. （2）为构建重组HPV疫苗，科研人员将L1基因插入质粒中，最好选择限制酶进行共同切割，原因是（答出2点即可）。重组质粒导入大肠杆菌后，可用添加的选择性培养基筛选。
5. （3）有人认为，与传统的减毒或灭活疫苗相比，重组疫苗安全性更高，试从疫苗的成分角度推测其这一观点的合理性：。
7. （4） HPV疫苗也可能通过蛋白质工程来生产。蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，通过对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质，以满足人类的需求。
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