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1. (2024·江西模拟) 培育耐盐碱作物对保障粮食安全具有重要意义。研究人员将野生大豆S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因GsSAMS转入水稻中，增强了水稻对盐碱的耐受性。下列叙述正确的是（　　）

A . GsSAMS基因的转入增加了水稻染色体的数量 B . GsSAMS基因转入水稻后最终定位于核糖体中 C . GsSAMS基因在水稻中使用与大豆不同的遗传密码 D . GsSAMS基因在水稻中成功表达了其编码的蛋白质

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1. (2024·安徽模拟) 萝卜是百姓喜爱的一种蔬菜，筛选优良性状，开展种质创新，对落实国家“种业振兴行动”计划，丰富“菜篮子工程”有重大应用价值。
1. （1）采用常规杂交育种，可培育出不同根形的品种。萝卜的根形由A、a和R、r两对等位基因控制，且独立遗传。现将两种稳定遗传的圆形萝卜进行杂交，F₁全为扁形；F₁自交，F₂有扁形、圆形和长形三种表型，比例为9：6：1。由题意可知，F₂中，长形萝卜的基因型为，扁形萝卜中杂合子比例为。
3. （2）利用返回式航天器搭载萝卜种子可使细胞产生基因突变。假设突变发生在某基因的内部，若编码区缺失一个核苷酸，则会引起编码的肽链改变；若突变是一个核苷酸的替换，但没有引起编码的蛋白质功能改变，其原因可能是（答出2点即可）。
5. （3）萝卜硫素具有抗炎、抗癌等生理功能，由黑芥子酶（Myr）水解前体物质形成。研究人员提取总RNA、逆转录形成cDNA，然后设计Myr基因特异引物，采用PCR方法扩增目的基因，经凝胶电泳后，发现有多条扩增带（其中也包含目的基因片段）。在不改变引物、PCR扩增体系和模板量的情况下、可采用的方法，特异扩增目的片段。研究人员对扩增出的DNA片段进行了序列测定，序列信息见下图，推测其最多可以编码个氨基酸的多肽（终止密码子为UAA/UAG/UGA）。在多肽合成过程中，tRNA“搬运”氨基酸到核糖体上，氨基酸结合部位在tRNA的端。
7. （4）研究人员希望采用Ti质粒上的T-DNA转移Myr基因，以便获得萝卜新品种。图中A、B、C、D、E为5种限制酶及其酶切位点，选用（填字母）进行酶切，以使插入T-DNA中的目的基因正确表达；将转入目的基因的体细胞培养形成，分化成植株，用于生产。
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1. (2024·高三上期末·潮州) 成纤维细胞生长因子21（FGF21）是一种调节机体代谢的分泌型蛋白，具有降低血糖、提高胰岛素敏感性等生理活性。但由于FGF21稳定性差，导致FGF21药效较差。科研人员以含有FGF21基因（F）的重组质粒pSUMO-FGF21（p-F）为模板，对F进行定点突变，构建含突变基因的突变质粒PSUMO-mmtFGF21（p-mF），从而实现对FGF21的改造，部分过程如图1所示。据图回答下列问题：
1. （1）研究发现、改变FGF21中的氨基酸序列，可提高FGF21的稳定性。这首先需要在数据库中检索FGF21的氨基酸序列和，据此设计突变位点并对蛋白质结构进行模拟验证。
3. （2）通过PCR技术可实现对FGF21基因（F）进行定点突变。
  ①将引物、p-F（DNA模版）、缓冲液、无菌水、4种脱氧核苷酸和等加入微量离心管中，构成PCR体系进行反应。
  ②用于定点突变的引物长度不能过短，否则会由于，导致定点突变失败。
  ③应选择图2中的哪对引物进行定点突变。
  A.1和4
  B.2和3
  C.1和3
  D.2和4
5. （3）在转化大肠杆菌时，用低温和溶液处理大肠杆菌细胞，使其成为感受态细胞，有利于突变质粒进入大肠杆菌中。培养一段时间后，取适量菌液涂布在含有平板上筛选出含p-mF的细胞（菌落）。
7. （4）已筛选出含mF的大肠杆菌繁殖的后代中出现不含有mF的菌体，为了解决这一问题，最佳的方案是。
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1. (2023高二下·遵义期末) 柑橘溃疡病是由地毯草黄单胞杆菌引起的、发生在柑橘的一种病害。利用基因工程将来自水稻的Xa27基因导入柑橘外植体细胞，再利用植物组织培养技术可培育无病毒植株。如图表示科研人员利用柑橘幼苗获得抗病转基因植株的过程，回答下列问题：
1. （1）获得转基因抗病柑橘的核心步骤是，该过程的操作工具包括。
3. （2）共培养时，Ti质粒的作用是。
5. （3）脱分化与再分化过程中所用培养基需要更换，其中（填激素名称）的浓度和比例都会影响植物细胞的发育方向。
7. （4）从个体生物学水平鉴定转基因柑橘植株时，发现有几株不具备抗病能力，某同学推测是由于目的基因未成功导入受体细胞，另一同学认为还有可能是因为。
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1. (2023高二下·合肥期末) 研究人员将大麦细胞的LTP1基因导入啤酒酵母菌中，获得的啤酒酵母菌可产生LTP1蛋白，并酿出泡沫更加丰富的啤酒，下图为转基因啤酒酵母的生产过程。回答下列问题：
1. （1）已知DNA复制时子链的延伸方向是5'→3'，图1中A、B、C、D在不同情况下均可以作为引物，用PCR技术扩增LTP1基因时应该选用作为引物。
3. （2）是实施基因工程的核心。图2中的B为质粒，质粒和LTP1基因结合形成重组质粒C.重组质粒C在受体细胞中能够稳定存在并发挥作用，在LTP1基因的首端必须具有，尾端必须具有终止子，还必须含有标记基因和目的基因。
5. （3）为检测目的基因在受体细胞基因组中的整合情况，首先采用DNA分子杂交技术检测LTP1基因是否导入成功，需要从转基因啤酒酵母中提取DNA，用作探针与之杂交。
7. （4）为检测转基因啤酒酵母是否产生LTP1蛋白，除检测LTP1蛋白是否产生及含量外，还可观察转基因啤酒酵母所酿啤酒的进行判断，若能检测到LTP1蛋白，但效果差，可能的原因是；若经检测确定细胞中无LTP1蛋白，可采用PCR技术检测细胞中的RNA，如果能检测到mRNA，则可能是；如果检测后确定细胞中无LTP1蛋白的mRNA，但之前能检测到LTP1基因，则LTP1基因未能正常转录的原因可能是。
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1. (2023高二下·应县期末) 将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞，可以提高玉米中的赖氨酸含量；更换赖氨酸形成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸，使两种酶的活性提高，也可以提高玉米中的赖氨酸含量。以上两种技术分别属于(　　)

A . 基因工程、基因工程 B . 蛋白质工程、蛋白质工程 C . 基因工程、蛋白质工程 D . 蛋白质工程、基因工程

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1. (2023高二下·运城期末) 在基因工程操作中常用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测不同DNA片段。科研人员利用EcoRI和SamI两种限制酶处理某DNA分子，得到如下电泳图谱。其中1号泳道是标准DNA样品，2号、3号、4号分别是EcoRI单独处理、SamI单独处理、EcoRI和SamI共同处理后的电泳结果。下列说法错误的是（）

A . 该DNA可能是含1000bp的环状DNA分子 B . 据图可知该DNA分子中两种限制酶的酶切位点各有一个 C . EcoRI和SamI能够催化磷酸二酯键断裂 D . EcoRI和SamI的切点最短相距约800bp

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1. (2024高二下·怀仁期末) 科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ四种限制性内切核酸酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为氨苄青霉素抗性基因），其中①~④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，甲、乙表示相关结构或细胞。请据图作答：
1. （1）在构建重组DNA时，可用一种或多种限制性内切核酸酶进行切割，为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实验中应该选用限制性内切核酸酶分别对鱼抗冻蛋白基因和质粒进行切割。
3. （2）基因工程中的核心步骤是（填序号）。为了使目的基因正常表达，其上游必须有启动子，它是识别和结合的部位。若限制酶切出了平末端，要选择进行连接（填“E.coliDNA连接酶”或“T₄DNA连接酶”）。
5. （3）图中将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞的方法称为。它是利用载体Ti质粒中含有，可以将目的基因整合到宿主细胞的染色体DNA上。
7. （4）检测番茄植株细胞中鱼抗冻蛋白基因是否成功表达，从分子水平上常采用的方法是.
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1. (2024高二下·山西期末) 人参果果实具高蛋白、低脂肪、低糖等特点，对高血压和糖尿病有食疗功效；但由于其甜度不足、风味过于清淡而常被人们忽视。Brazzein是一类高甜度低热值的植物天然甜味蛋白。研究人员拟利用Brazzein蛋白基因和抗除草剂基因，培育出转基因改良人参果。回答下列问题：
1. （1）构建含有Brazzein基因的表达载体
  ①根据Brazzein基因核苷酸序列设计引物进行PCR扩增（图1甲）。图2乙是三种载体。因为Brazzein基因前端应有，后端应有，故引物1和引物2应分别引入、两种限制酶的识别序列。
  ②将Brazzein基因PCR扩增产物和载体A，用①中的两种限制酶酶切，再选用E•coliDNA连接酶或T4DNA连接酶进行连接，筛选得到含Brazzein基因的表达载体A'。
3. （2）构建含有Brazzein基因和抗除草剂基因的表达载体为了引入抗除草剂基因，可以用限制酶同时切割载体A'和载体B，将连接后的基因表达载体B导入大肠杆菌中，先接种在含有的培养基上进行培养，再采用影印法原位接种到含有的培养基上进行培养，通过对比，挑取在含有除草剂的培养基上（填“能”或“不能”）生长、同时在含氨苄青霉素的培养基上（填“能”或“不能”）生长的菌落，提取质粒；用（1）中两种限制酶进行酶切，酶切产物经电泳分离结果如图3，号菌落很可能是含有Brazzein基因和抗除草剂基因表达载体B（大小为11416bp）。
5. （3）构建含有合适启动子的基因表达载体
  已知C35启动子在植物不同组织器官中均能表达，E8启动子是果实特异性启动子，具有乙烯应答特性。科学家用SacI和KpnI等酶将载体B'中Brazzein基因的C35启动子替换成了载体C中的E8启动子，但并不替换载体B'中抗除草剂基因上游的C35启动子，其目的是。
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1. 2023年9月 20日，全球第二例转基因猪心脏成功移植到人体。该转基因猪是通过成纤维细胞克隆培养的，体内10多个基因经过了编辑。下列相关叙述错误的是（）

A . 需利用基因编辑技术敲除猪成纤维细胞内引起人体免疫排斥有关的基因 B . 将编辑后的猪成纤维细胞核移植到猪去核卵母细胞中并用电刺激促进融合 C . 融合后的重组细胞需要在 CO₂培养箱中完成早期胚胎培养 D . 挑选发育良好的原肠胚移植到同期发情的母猪体内继续发育直至分娩

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