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1. (2024高三下·武汉开学考) 图1表示DNA的平面结构示意图，图2表示某种限制酶的识别序列和作用位点，下列相关说法正确的是（）

A . 图1中a所示部位即图2中箭头所示部位 B . 图2所示的DNA片段被限制酶切割后获得的末端形式与图1下端相同 C . E▪co1iDNA连接酶可以将两个图1所示结构连接成为一个DNA片段 D . 基因工程的载体必须具有图2所示的碱基序列

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1. (2024高三下·武汉开学考) 据下图分析，下列有关基因工程的说法不正确的是（）

A . 为防止目的基因与质粒任意结合而影响基因的表达，应用限制酶Ⅰ、Ⅱ同时切割二者 B . 限制酶、DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键 C . 与启动子结合的是RNA聚合酶 D . 能够检测到标记基因表达产物的受体细胞中，也一定会有目的基因的表达产物

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1. (2024高三下·茂名月考) 为构建肝特异性CD36 基因敲除小鼠模型，研究人员利用Cre-loxP 系统开展实验。该系统中的Cre可识别DNA 分子中特定的loxP序列，当DNA 分子上存在两个同向loxP序列时，Cre可将两个loxP序列之间的 DNA序列剪除，切口连接形成的环化产物被降解，从而达到敲除特定基因的目的(如图1)。图2中的 A 鼠成对的 CD36 基因两侧均分别引入一个同向 loxP 序列(基因型表示为L⁺L⁺ $\text{[math]}$ 野生型为 L^-L^-) $\text{[math]}$ B鼠中含一个外源导入的Cre编码序列(基因型表示为(C⁺C⁺ $\text{[math]}$ 野生型为C^-C^-) $\text{[math]}$ ， Alb表示肝脏组织特异性启动子。研究人员利用 A、B两类工具鼠作为亲本，选用合适的杂交策略，即可获得基于Cre-loxP系统的肝特异性CD36 基因敲除目标小鼠。
回答下列问题：
1. （1）图 2 中 A 鼠的基因型可表示为L⁺L⁺ C^-C^- 。目标小鼠的基因型表示为。A鼠与B鼠杂交获得的子一代的基因型及比例为。欲获得目标鼠，应继续进行的实验操作是。
3. （2）启动子的作用是。图1中 Cre能将双链DNA 在特定部位切割开，其作用类似于基因操作工具中的。研究人员取鼠尾细胞通过(法)鉴定子代1~8号小鼠的基因型，结果如图3(已知 A 鼠、B鼠的基因型检测结果分别与图3 中子代6号、1号小鼠相同)，代表目标小鼠的是号，判断依据是。
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1. (2024高三下·成都开学考) 有些人由于乳糖酶分泌少，不能完全消化牛奶中的乳糖，饮用牛奶后易出现腹泻等不适症状，这称为乳糖不耐受。为了解决这一问题，科学家将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，使获得的转基因奶牛分泌的乳汁中，乳糖的含量大大降低，而其他营养成分不受影响。根据如下操作流程回答相关问题：
1. （1）通过图中②过程采集的B奶牛精子不能直接使成熟的卵细胞受精，常要用化学诱导法对奶牛的精子进行处理，即用一定浓度的处理。
3. （2）为了获得更多的卵母细胞，在进行①过程前，需要用处理奶牛A，从输卵管中采集卵母细胞后，还需要体外培养至期，才可以进行③过程；③过程表示的胚胎工程技术为。
5. （3） ④过程表示基因表达载体的建构过程，概述其操作流程。
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1. (2023高三上·茂名月考) C基因编码具有高度特异性杀虫活性的C蛋白，V基因编码的V蛋白是结构和作用机理不同于 C蛋白的杀虫蛋白。利用C-V融合基因和载体(如图)，获得具有高抗虫性的转基因玉米。回答下列问题：
1. （1）作为基因工程的载体需要具备的条件有(答两点)。将C-V融合基因插入到T-DNA中，插入不会破坏 T-DNA的作用，T-DNA的作用是。
3. （2）一般用相同的限制酶分别切割含C-V融合基因的DNA片段和载体，目的是，然后将切割后的片段拼接起来，需使用酶处理。载体中卡那霉素抗性基因作为，可将含目的基因的受体细胞筛选出来。
5. （3）从个体水平对转基因玉米进行检测与鉴定，具体方法是。与导入一种抗虫基因相比，此玉米的优点是。
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1. (2023高三上·福田月考) 草莓营养价值高，被誉为是“水果皇后"，中国国内优良品种草莓栽培的品种很多。下图为利用现代生物技术改良草莓品系的过程，相关叙述错误的是（）

A . 过程Ⅰ的原理是基因重组，能够定向改变生物的遗传性状 B . 过程Ⅱ可直接用聚乙二醇作为化学诱导剂来诱导植物细胞融合 C . 凤梨风味绿草莓植株的培育原理有细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 D . 杂种细胞A形成的标志是再生出新的细胞壁，该过程与高尔基体和线粒体有关

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1. (2024·江西模拟) 萤火虫的荧光素酶能催化ATP激活的荧光素氧化发光，这一现象在生物检测和成像方面有重要的应用价值。为了解决天然荧光素酶不能高效催化人工合成的荧光素DTZ发光的问题，研究人员采用蛋白质工程（又称为第二代基因工程）对它进行了改造。下列关于蛋白质工程改造天然荧光素酶的叙述，正确的是（　　）

A . 通过化学诱变剂可定向改造天然荧光素酶的基因序列 B . 改造天然荧光素酶所用的基因表达载体不需要启动子和终止子 C . 可用PCR方法检测突变的荧光素酶基因是否翻译成蛋白质 D . 改造后的荧光素酶在一定条件下催化DTZ发光是将化学能转化为光能

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1. (2024·江西模拟) 培育耐盐碱作物对保障粮食安全具有重要意义。研究人员将野生大豆S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因GsSAMS转入水稻中，增强了水稻对盐碱的耐受性。下列叙述正确的是（　　）

A . GsSAMS基因的转入增加了水稻染色体的数量 B . GsSAMS基因转入水稻后最终定位于核糖体中 C . GsSAMS基因在水稻中使用与大豆不同的遗传密码 D . GsSAMS基因在水稻中成功表达了其编码的蛋白质

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1. (2024·安徽模拟) 萝卜是百姓喜爱的一种蔬菜，筛选优良性状，开展种质创新，对落实国家“种业振兴行动”计划，丰富“菜篮子工程”有重大应用价值。
1. （1）采用常规杂交育种，可培育出不同根形的品种。萝卜的根形由A、a和R、r两对等位基因控制，且独立遗传。现将两种稳定遗传的圆形萝卜进行杂交，F₁全为扁形；F₁自交，F₂有扁形、圆形和长形三种表型，比例为9：6：1。由题意可知，F₂中，长形萝卜的基因型为，扁形萝卜中杂合子比例为。
3. （2）利用返回式航天器搭载萝卜种子可使细胞产生基因突变。假设突变发生在某基因的内部，若编码区缺失一个核苷酸，则会引起编码的肽链改变；若突变是一个核苷酸的替换，但没有引起编码的蛋白质功能改变，其原因可能是（答出2点即可）。
5. （3）萝卜硫素具有抗炎、抗癌等生理功能，由黑芥子酶（Myr）水解前体物质形成。研究人员提取总RNA、逆转录形成cDNA，然后设计Myr基因特异引物，采用PCR方法扩增目的基因，经凝胶电泳后，发现有多条扩增带（其中也包含目的基因片段）。在不改变引物、PCR扩增体系和模板量的情况下、可采用的方法，特异扩增目的片段。研究人员对扩增出的DNA片段进行了序列测定，序列信息见下图，推测其最多可以编码个氨基酸的多肽（终止密码子为UAA/UAG/UGA）。在多肽合成过程中，tRNA“搬运”氨基酸到核糖体上，氨基酸结合部位在tRNA的端。
7. （4）研究人员希望采用Ti质粒上的T-DNA转移Myr基因，以便获得萝卜新品种。图中A、B、C、D、E为5种限制酶及其酶切位点，选用（填字母）进行酶切，以使插入T-DNA中的目的基因正确表达；将转入目的基因的体细胞培养形成，分化成植株，用于生产。
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1. (2024·高三上期末·潮州) 成纤维细胞生长因子21（FGF21）是一种调节机体代谢的分泌型蛋白，具有降低血糖、提高胰岛素敏感性等生理活性。但由于FGF21稳定性差，导致FGF21药效较差。科研人员以含有FGF21基因（F）的重组质粒pSUMO-FGF21（p-F）为模板，对F进行定点突变，构建含突变基因的突变质粒PSUMO-mmtFGF21（p-mF），从而实现对FGF21的改造，部分过程如图1所示。据图回答下列问题：
1. （1）研究发现、改变FGF21中的氨基酸序列，可提高FGF21的稳定性。这首先需要在数据库中检索FGF21的氨基酸序列和，据此设计突变位点并对蛋白质结构进行模拟验证。
3. （2）通过PCR技术可实现对FGF21基因（F）进行定点突变。
  ①将引物、p-F（DNA模版）、缓冲液、无菌水、4种脱氧核苷酸和等加入微量离心管中，构成PCR体系进行反应。
  ②用于定点突变的引物长度不能过短，否则会由于，导致定点突变失败。
  ③应选择图2中的哪对引物进行定点突变。
  A.1和4
  B.2和3
  C.1和3
  D.2和4
5. （3）在转化大肠杆菌时，用低温和溶液处理大肠杆菌细胞，使其成为感受态细胞，有利于突变质粒进入大肠杆菌中。培养一段时间后，取适量菌液涂布在含有平板上筛选出含p-mF的细胞（菌落）。
7. （4）已筛选出含mF的大肠杆菌繁殖的后代中出现不含有mF的菌体，为了解决这一问题，最佳的方案是。
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