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基因工程的应用
1. 为构建肝特异性CD36 基因敲除小鼠模型,研究人员利用Cre-loxP 系统开展实验。该系统中的Cre可识别DNA 分子中特定的loxP序列,当DNA 分子上存在两个同向loxP序列时,Cre可将两个loxP序列之间的 DNA序列剪除,切口连接形成的环化产物被降解,从而达到敲除特定基因的目的(如图1)。图2中的 A 鼠成对的 CD36 基因两侧均分别引入一个同向 loxP 序列(基因型表示为L
+
L
+
野生型为 L
-
L
-
)
B鼠中含一个外源导入的Cre编码序列(基因型表示为(C
+
C
+
野生型为C
-
C
-
)
, Alb表示肝脏组织特异性启动子。研究人员利用 A、B两类工具鼠作为亲本,选用合适的杂交策略,即可获得基于Cre-loxP系统的肝特异性CD36 基因敲除目标小鼠。
回答下列问题:
(1) 图 2 中 A 鼠的基因型可表示为L
+
L
+
C
-
C
-
。目标小鼠的基因型表示为
。A鼠与B鼠杂交获得的子一代的基因型及比例为
。欲获得目标鼠,应继续进行的实验操作是
。
(2) 启动子的作用是
。图1中 Cre能将双链DNA 在特定部位切割开,其作用类似于基因操作工具中的
。研究人员取鼠尾细胞通过
(法)鉴定子代1~8号小鼠的基因型,结果如图3(已知 A 鼠、B鼠的基因型检测结果分别与图3 中子代6号、1号小鼠相同),代表目标小鼠的是
号,判断依据是
。
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