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1. (2024高二下·肇庆期中) 从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是（）

A . 合成编码目的肽的DNA片段 B . 构建含目的肽DNA片段的表达载体 C . 依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽 D . 筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽

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1. (2024高二下·湖南期中) 母乳来源的胆盐激活酯酶(BSSL)是一种脂肪酶，具有广泛的底物水解活性，对乳脂消化吸收具有重要作用。因此，对胆盐激活酯酶的研究是“人乳化牛奶”计划的重要组成部分。下图表示含有BSSL基因的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，限制性内切核酸酶MspI、SmaI识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、CCC↓GGG。下列叙述错误的是（）

A . 限制酶能识别双链DNA中特定核苷酸序列，并断开特定位置的磷酸二酯键 B . 若用MspI酶切割BSSL基因产生的黏性末端只能用E.coliDNA连接酶连接 C . 若要将外源基因导人细胞，可以用质粒、噬菌体、动植物病毒等作为载体 D . 若用限制酶Sma I完全切割图中DNA片段，其产物长度为339 bp、9844 bp、533 bp

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1. (2024高二下·衡水期中) 作为基因工程中的“分子运输车”——载体，应具备的条件是（）
①必须有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上
②载体必须具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制
③必须带有标记基因，以便进行重组后的筛选
④必须是安全的，不会对受体细胞有害，或不能进入到除受体细胞外的其他生物细胞中去

A . ①③④ B . ②③④ C . ①②④ D . ①②③④

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1. (2024高三下·曲靖模拟) 继世界首例猪心脏移植患者去世后，第二例猪心脏移植患者也于2023年10月31日去世，心脏移植需要解决的问题之一是防止心脏发生缺血再灌注损伤（IRI），研究发现根据Caspase8基因合成的siRNA可使Caspase8基因表达受阻，从而抑制IRI所致的器官损伤，下图是利用猪的心肌细胞进行siRNA作用研究的示意图，请据图回答以下问题：
1. （1）获得siRNA对应的DNA序列后可利用PCR技术进行扩增，常采用（填方法）来鉴定PCR的产物；基因工程的核心步骤过程②是，该过程需要将siRNA对应的DNA序列正确插入到之间。
3. （2）对猪的心肌细胞进行培养时需要加入血清等天然物质，原因是。
5. （3）据图可知siRNA阻止Caspase8基因表达的原理是。
7. （4）虽然两例手术都以失败告终，但是也给科学带来极大的进步，你认为异种器官如果移植成功，将可以解决哪些问题?（答两点）。
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1. (2024高三下·西山模拟) 多不饱和脂肪酸（PUFAs）是人体必需脂肪酸，为解决猪肉中PUFAs含量不足的问题，研究者从线虫中获得控制PUFAs合成的必需酶基因fat1，培育转fat1基因猪，操作过程如图所示。图中GFP基因表达出绿色荧光蛋白。看图回答下列问题：
1. （1）用PCR技术在体外扩增目的基因时，PCR扩增仪中要加入缓冲液、目的基因、（至少答两点）等。
3. （2）从图中可知，在构建基因表达载体时，为克服目的基因自身环化，即线性DNA的末端相互连接，变圆环，以及便于目的基因与载体的连接，切割含目的基因的DNA和载体的限制酶应选用和。
5. （3）构建的基因表达载体中，GFP基因的作用是。除GFP基因外，未标注出的必需元件还有。
7. （4）猪成纤维细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期，以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，需要分瓶再继续培养，分瓶后的培养过程称为，操作时首先用处理成细胞悬液。
9. （5）经检测，fat1基因成功整合在猪基因组DNA后，（填“能”或“不能”）说明成功培育转基因猪，理由是。
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1. (2024高三下·西山模拟) 谷氨酸钠是味精的主要成分，通过发酵罐发酵可大规模生产谷氨酸，生产中常用的菌种是谷氨酸棒状杆菌。下面有关谷氨酸发酵工程的叙述，错误的是（）

A . 为解决发酵罐中杂菌污染的问题，可向培养液中添加抗生素 B . 谷氨酸发酵的培养基成分，主要有水、碳源、氮源、无机盐等 C . 对发酵罐内物质进行搅拌能增加产量，说明谷氨酸棒状杆菌是好氧菌 D . 优良性状的菌种可以通过基因工程定向改造已有菌种获得

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1. (2024高一下·丹寨期中) 科研工作者将苏云金杆菌的Bt抗虫基因导入普通品系棉花，获得了三个纯合抗虫品系甲、乙和丙。将三个抗虫品系与普通品系棉花杂交，F₁均表现为抗虫，且F₁自交所得F₂的表型及比例为抗虫：不抗虫=3：1。回答下列问题：
1. （1）将苏云金杆菌的Bt抗虫基因导入普通品系棉花可以采用法。若将Bt抗虫基因插入某种细菌Ti质粒的T-DNA上，再让其侵染普通品系棉花的细胞，该过程主要利用了细菌Ti质粒的特点，成功将Bt抗虫基因导入棉花细胞。
3. （2）以上实验结果表明，甲、乙、丙三个品系中Bt抗虫基因的遗传都遵循定律。
5. （3）将上述过程获得的甲、乙、丙三个纯合品系相互杂交，得到的结果如下：
  甲×乙→F₁抗虫→F₂的表型及比例为抗虫：不抗虫=15：1
  乙×丙→F₁抗虫→F₂的表型及比例为抗虫：不抗虫=15：1
  丙×甲→F₁抗虫→F₂全表现为抗虫
  若依次用A/a、B/b、C/c…表示甲、乙、丙三个品系染色体上的Bt抗虫基因，由杂交实验结果判断，甲、乙、丙三个品系中Bt抗虫基因所在染色体的位置关系是什么？请在如图细胞中画出相关基因在染色体上的位置。
7. （4）通过基因工程另获得一对纯合抗虫基因的品系丁，若要通过杂交实验来确定丁品系中的Bt抗虫基因是插入新的染色体上，还是和乙的Bt抗虫基因位于同一对染色体上，请写出该实验的设计思路：。
  预期实验结果和结论：
  若，则丁品系的Bt抗虫基因是插入新的染色体上。
  若，则丁品系的Bt抗虫基因和乙的Bt抗虫基因位于同一对染色体。
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1. (2024高三下·河池模拟) 某动物体内含有研究者感兴趣的目的基因，研究者欲将该基因导入大肠杆菌的质粒中保存。该质粒含有氨苄青霉素抗性基因（Amp^R）、LacZ基因及一些酶切位点，其结构和简单的操作步骤如下图所示。回答下列问题：
1. （1）构建基因表达载体时，为了提高目的基因与载体的连接效率，最好用处理质粒和目的基因，目的基因之所以可以稳定存在及表达，是因为基因表达载体中有。
3. （2）将目的基因导入大肠杆菌前，需要用CaCl₂处理大肠杆菌，目的是。
5. （3） Amp^R和LacZ的作用是，取⑤中菌落为含有目的基因的菌落。
7. （4）从蛋白质加工角度看，与大肠杆菌相比，乳腺生物反应器生产胰岛素的优点是。
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1. (2024高三下·河池模拟) 目的基因和载体如果用同一种限制酶处理，连接时会出现正反接的情况，为鉴定筛选出的表达载体中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR后，结合电泳技术鉴定，图示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，其中目的基因为长度300bp的片段。下列有关说法不正确的是（　　）

A . PCR退火温度不宜太低，避免引物错配和模板链形成双链 B . 电泳条带迁移的位置和速度与DNA分子的大小、带电量和构象有关 C . 选取引物甲丙，扩增出450bp长度片段时，可以说明目的基因正接 D . 选取引物甲乙，扩增出400bp长度片段时，可以说明目的基因反接

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1. (2024高三下·安顺模拟) UCP1是一种线粒体转运蛋白，有减少ATP合成、增加产热的功能。家猪在进化中出现UCP1基因假基因化（即UCP1基因一般不表达）。我国科研人员利用基因编辑技术，成功培育了UCPl基因在白色脂肪组织中特异性表达的UCP1家猪，提高了瘦肉率。下列分析正确的是（）

A . 在线粒体的内膜和基质中均能合成大量的ATP B . UCP1基因编辑家猪的瘦肉率提高，是一个新物种 C . UCP1基因编辑家猪脂肪的消耗量增加，体脂比例降低 D . 提高UCP1基因启动子的甲基化程度能有效促进其表达

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