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1. (2024高三下·韶关模拟) 科学家利用蛋白质工程技术将水蛭素（一种可用于预防和治疗血栓的蛋白质）第47位的天冬酰胺替换为赖氨酸，显著提高了它的抗凝血活性，流程图如下。已知天冬酰胺对应的密码子为AAU、AAC，赖氨酸对应的密码子为AAA、GUA等。下列叙述错误的是（　　）

A . 上图的操作流程是从预期的水蛭素功能出发的 B . 在这项替换研究中目前可行的直接操作对象是基因 C . 上图中大分子物质a和b的单体序列均是唯一的 D . 用蛋白质工程可生产基因工程所不能生产的蛋白质

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1. (2024高三下·广州模拟) 人乳铁蛋白（hLTF）是一种铁结合的糖蛋白，具有抑菌、提高免疫力等重要功能。研究者通过转基因技术培育能生产hLTF的奶牛，从牛奶中分离提纯hLTF，回答下列问题。
1. （1）从原核生物中获取的质粒不适用于直接构建真核生物的表达载体，其启动子需要进行替换才有可能在真核细胞中表达，主要原因是。
3. （2）研究人员采用小鼠乳清酸蛋白基因的启动子和终止子来替换pA 质粒中的部分序列，再拼接hLTF 基因，最终形成pW2-hLTF 重组质粒，过程如下图：
  注：Nrul、Mlul和Notl是三种限制酶，图中表示相应限制酶的识别序列和切割位点。pA、pW1、pW2和pW2-hLTF表示不同阶段的质粒。
  通过PCR 扩增小鼠乳清酸蛋白基因的启动子、终止子和hLTF 基因时，均需引入限制酶的识别序列和切割位点，以便剪接到质粒的指定位置。据图分析，PCR 扩增小鼠乳清酸蛋白基因的启动子所需的两种引物应分别包含、（限制酶）的识别序列，将修饰后的hLTF基因插入到重组质粒的启动子和终止子之间后，不一定能获得所需要的基因表达载体，原因是。
5. （3）经检测筛选所获得的基因表达载体pW2-hLTF通过的方法导入到奶牛的受精卵细胞中，以获得能产生hLTF 的转基因奶牛。
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1. (2024高三·广东模拟) 果蝇Y染色体上的SRY基因决定雄性性别的发生，在X染色体上无等位基因。为实现基于体色持续分离雌雄，培育果蝇的性别自动鉴定体系，研究人员设计了相关的诱变育种方案。据此回答下列问题：
1. （1）果蝇的灰色（B）对黑色（b）为显性。研究人员用射线照射果蝇M如图，已知射线照射后Y染色体携带SRY基因的片段可转移到其他染色体上且能正常表达，不含SRY基因的染色体片段丢失。该过程涉及的变异类型是。
3. （2）研究人员将射线照射后的果蝇M与正常黑色雌果蝇杂交，统计后代雄果蝇的性状及比例，得到部分结果如下表所示。已知只含一条染色体的雌果蝇胚胎致死，其他均可存活且繁殖能力相同。
  　
  Ⅰ组
  Ⅱ组
  Ⅲ组
  子代雄果蝇的性状及比例
  灰色∶黑色=1∶1
  灰色∶黑色=1∶0
  灰色∶黑色=0∶1
  ①Ⅰ组结果说明果蝇携带SRY基因的染色体片段转移到（填“X”“B所在的”或“b所在的”）染色体，其子代黑色雄果蝇的基因型是。
  ②第组的杂交模式的后代可持续应用于生产实践，原因是，其优势是可通过果蝇的体色筛选即可达到分离雌雄的目的。
  ③Ⅱ组子代连续随机交配多代后，子代雌性个体所占的比例会。
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1. (2024高三·广东模拟) 利用农杆菌转化法将苏云金杆菌的Bt基因导入棉花细胞获得抗虫棉，可有效减少农药使用，提高棉花产量。下列相关叙述错误的是（　　）

A . 农杆菌转化法和肺炎链球菌转化实验的原理相同 B . 苏云金杆菌和棉花的基因都是有遗传效应的DNA片段 C . 农杆菌转化法一般需要农杆菌的Ti质粒作为表达载体 D . 由该种方法获得的转基因抗虫棉无法将抗虫基因遗传给子代

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1. (2024高三·广东模拟) 某种病毒可通过其S蛋白和RBD蛋白与人体细胞表面的受体结合而进入细胞，是宿主抗体的重要作用位点。下图是科研人员利用该病毒S蛋白基因和RBD蛋白基因，研制该病毒双抗原疫苗的技术路线。
1. （1） PCR扩增时，需在催化下，在两种引物的端进行DNA链的延伸，获得扩增产物。
3. （2）为使S-RBD基因能与pX质粒相连接，并在工程菌中表达时先合成S蛋白，则PCR过程中，应在引物1的5^'端添加的限制酶序列是。
5. （3）将重组pX质粒导入工程菌前，需用钙离子处理工程菌，使其处于一种的生理状态，便于重组质粒的导入。
7. （4）在工程菌的筛选时，可先后用两种抗生素进行影印培养实验（即先将工程菌接种到培养基A上，待长出菌落后使用无菌的绒毡布压在培养基A的菌落上，带出少许菌种，平移并压在培养基B上），则培养基A上应添加的抗生素为（填“青霉素”或“四环素”）。若培养基B中有存活的菌落，则这些菌落的细胞内（填“含”或“不含”）S-RBD基因。鉴定pX质粒和重组pX质粒是否导入工程菌还可以采用的方法是。
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1. (2024高三·大亚湾模拟) DNA双链断裂（DSB）是真核生物中一种严重的DNA损伤形式，哺乳动物体内存在相关机制修复DSB。在修复过程中可能会发生改变遗传信息的情况，例如丢失DNA上的甲基化信息（表观遗传信息改变）或发生基因突变，从而对基因的表达产生影响。已知DSB可以导致生物个体衰老，但相关的分子机制尚未明确。回答下列问题：
1. （1）用I-PpoI酶处理DNA可导致DSB，作用机理见图1。I-PpoI酶由I-PpoI基因编码，能够识别主要存在于非编码区（DNA中不能编码蛋白质的区段）的序列5^'-CTCTCTTAAGGTAGC-3^' ，使第9位A与第10位G之间的键断开，据此可知该酶属于酶。科学家选用该酶诱发DSB，可以尽量减少带来的影响。
3. （2）为了探究DSB是通过表观遗传信息改变还是基因突变导致衰老，科学家以小鼠作为研究材料进行相关实验。该实验的流程大致如图2：
  ①在实验前，利用基因工程技术将I-PpoI基因导入到小鼠细胞中，诱导表达后需通过法检测细胞内是否产生I-PpoI酶。若产生I-PpoI酶，则会导致实验组小鼠发生信息的变化。表观年龄是根据整个基因组有多少碱基失去了原有的甲基作为测量依据。实验前，对照组和实验组小鼠的表观年龄应。
  ②若实验结果为：与对照组相比，实验组小鼠；且当实验组出现明显的衰老表型时，对照组依然保持年轻的状态，则证明DSB引起的表观遗传变化导致衰老。
  ③若出现上述实验结果，科学家还需要对实验组小鼠进行基因治疗，使其恢复年轻时的表观遗传信息。若，则能确立表观遗传变化与衰老之间的因果关系。
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1. (2024高三·江门模拟) 在构建基因表达载体时，传统方法常受限于限制酶识别序列。科研人员研发了新的DNA重组方法： In-Fusion技术。该技术关键是要在目的基因两端构建与线性化质粒末端相同的DNA序列（即同源序列），然后用In-Fusion酶处理，使同源序列形成黏性末端，最终形成的重组质粒会在受体细胞内形成完整的重组序列。主要操作过程如图示。下列叙述错误的是（）

A . 推测In-Fusion酶的作用是识别同源序列、形成黏性末端、连接磷酸二酯键 B . 载体A端和B端的序列不同，可防止目的基因与质粒反向连接及自身环化 C . 形成重组质粒时，如果温度远高于50℃，黏性末端的碱基不容易互补配对 D . 该技术无需识别特定切割位点，需识别目的基因与线性质粒任意同源序列

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1. (2024高三下·威宁月考) 科学家将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达，请回答：
1. （1）该研究除了证明质粒可以作为载体外，还证明了（答出一点即可）。
3. （2）体外重组的质粒可通过Ca²⁺参与的转化方法导入大肠杆菌细胞，而体外重组的噬菌体DNA通常需与组装成完整的噬菌体后，才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞，在细菌、胚胎干细胞、根尖分生区细胞、酵母菌中，可作为重组噬菌体宿主细胞的是。
5. （3）真核生物基因（目的基因）在大肠杆菌细胞里表达时，表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解，在实验室中应选用缺陷型的大肠杆菌作为受体细胞，在蛋白质纯化的过程中应添加的抑制剂。
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1. (2024高二下·普宁月考) 某种经济作物有高秆抗病（DDTT）和矮秆易感病（ddtt）两个品种，控制两对性状的基因的遗传遵循自由组合定律。某科研小组利用不同的方法进行了如下三组实验。下列相关叙述正确的是（）

A . 甲组的F₂中矮秆抗病I有大部分不能稳定遗传 B . 乙组经花药离体培养所得矮秆抗病II可直接用于生产 C . 丙组的物理诱变因素（γ射线）能诱导基因定向突变 D . 三组方法中，最不容易获得矮秆抗病新品种的方法是乙组

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1. (2023高三上·长沙期末) 拟南芥体内的基因X具有多个启动子，通过一种光敏色素作为受体，对光刺激进行应答，由此选择不同的启动子并转录出长度不同的mRNA，从而表达出存在于细胞内不同位置的不同蛋白质，由此使拟南芥呈现出不同的生长状态。其相关蛋白的合成过程如下图所示。
1. （1）两种蛋白质( 填“a”或 “b”) 末端的氨基酸序列相同，该末端对应的是蛋白质的(填“ -NH₂ ” 或“-COOH”)末端。a末端是引导蛋白质被运输进入叶绿体的信号肽段。
3. （2）研究人员通过特定技术，将绿色荧光蛋白 (GFP) 的基因片段插入到基因X的特定位置，使表达出的蛋白质X①、X②能带有绿色荧光蛋白，以实现它们在细胞内的可视化，由此得到A系植株 (GFP基因不含启动子和终止子)。
  ① 根据图1，GFP基因片段应插入到基因X内字母表示的特定位置。
  ②GFP基因来自于水母等动物的细胞中，需先选择合适的限制酶将其从染色体DNA上切割下来。GFP基因两侧的碱基序列如图2所示，根据碱基序列应选择下表中的进行切割。
  限制酶
  识别序列
  BamHI
  G↓GATCC
  CCTAG↑G
  HindIII
  A↓AGCTT
  TTCGA↑A
  Notl
  G↓CGGCCGC CGCCGGC↑G
  EcoRI
  G↓AATTC
  CTTAA↑G
  ③酶切前需对GFP基因进行PCR扩增，b侧所用引物已经确定， a侧引物需在以下4种中进行选择。根据a侧序列应选择不选其他3种的理由是。在PCR仪中完成4个循环后，含有该引物的DNA片段数为个。
  引物1：5'ATCCTGCTA3’
  引物2：5'TATGGATCC3’
  引物3：5GGATCCATA3’
  引物4：5GGAAGGATA3’
5. （3）研究人员在A系植株的基础上，去除产生光敏色素的基因后得到B系植株。随后，分别在黑暗条件和红光条件下培养A 、B两系植株，培养条件及观测到荧光的部位如下表所示。
  表1 GFP荧光的局部部位
  发育条件
  黑暗条件
  红光条件
  A系植物
  细胞质基质
  叶绿体
  B系植物
  细胞质基质
  细胞质基质
  根据以上研究结果， A系植株对红光刺激作出应答被激活的原因是
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