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1. (2024高二下·诸暨月考) 下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是（）

A . 一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B . 限制性内切酶的活性受温度影响 C . 限制性内切酶能识别和切割RNA D . 限制性内切酶可从原核生物中提取

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1. (2024高二下·定海月考) 下列关于生物技术安全性与伦理问题的叙述，正确的是（）

A . 我国对农业转基因生物实行标识制度，必须在标签上警示性注明可能危害 B . 生殖性克隆人能丰富人类基因的多样性，可在特定人群中进行相关实验 C . 可通过基因编辑技术对基因进行敲除、插入等，来设计完美试管婴儿 D . 针对转基因技术的应用，我国的方针是研究上要大胆，推广上要慎重

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1. (2024高二下·定海月考) 图为构建苘麻抗除草剂基因A重组质粒的技术流程，其中NptⅡ是卡那霉素抗性基因，GUS基因仅在真核细胞中表达，表达产物可催化底物呈蓝色。下列说法错误的是（）

A . PCR扩增A时可在引物中加入PstI和XhoI的酶切位点 B . 在培养基中添加卡那霉素初步筛选导入重组质粒的农杆菌 C . 用农杆菌转化植物愈伤组织选择呈现蓝色的组织进行培养 D . 启动子若为除草剂诱导启动子将减少细胞物质和能量浪费

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1. (2024高二下·东莞月考) 如图表示构建重组质粒和筛选含人胰岛素原基因的细菌的过程，其中I和II表示抗性基因，①—⑦表示过程，其它数字表示菌落。下列有关叙述正确的是（）
（注：⑦过程表示用灭菌绒布从含氨苄青霉素培养基中蘸取菌种，再按到含四环素培养基中培养）

A . ①②只能用同一种限制性核酸内切酶进行切割 B . I表示抗氨苄青霉素基因，II表示抗四环素基因 C . 3、5菌落是筛选出的含有人胰岛素原基因的细菌 D . 该基因工程成功的标志是细菌合成具有生物活性的胰岛素

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1. (2024高二下·东莞月考) 半乳糖血症是单基因遗传病，科学家将正常基因D导入该病患者的细胞，以治疗该病。图甲为A、B、C三种质粒，图乙为含有目的基因D的DNA片段，图丙为重组载体的示意图。Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，其表达产物可以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质，使菌落呈蓝色，EcoRI（0.6Kb）、PvuI（0.8Kb）为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。请回答：
1. （1）基因工程操作的核心步骤是。图甲中三种质粒适宜作为运载体的是质粒，与另外两种质粒相比，其作为载体的优点是。
3. （2）为了提高实验成功率，需要通过技术扩增目的基因，以获得目的基因的大量拷贝，该技术原理为。
5. （3）获取目的基因D时应选择乙图中的对其所在的DNA进行切割。将目的基因D和甲图中相应质粒连接后，得到图丙中三种方式。为选出正向连接的重组质粒，使用对质粒完全酶切后，进行电泳分析。若是正向连接载体，电泳图谱中出现长度为Kb和5.5 Kb两条带。
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1. (2024高二下·封开期中) 科学家创造了“基因敲除”技术：将外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中，使某一个基因被取代或破坏而失活，然后将修饰后的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎，形成嵌合体小鼠。科学家已经利用上述技术成功地把人类囊肿性纤维化病的致病基因移植到小鼠身上，培育出了患囊肿性纤维化病的小鼠。下列有关叙述错误的是（　　）

A . 通过上述“基因敲除”技术可以定向改变生物体的遗传性状 B . 在“基因敲除”中需要用到限制性内切核酸酶、DNA连接酶等 C . 这种嵌合体小鼠长大后，体内存在外源基因，但不会遗传给后代 D . “基因敲除”技术有利于人类对某些遗传因素引发的疾病进行研究

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1. (2024高二下·封开期中) 应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：
1. （1）在培育转人生长激素基因牛过程中，进行基因表达载体构建时，人生长激素基因的上游必须含有。①过程需要的工具酶是，③过程培养到桑葚胚或囊胚阶段，可以采用技术，培育出多头相同的转基因犊牛。
3. （2） prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是细胞，Ⅲ代表的细胞具有的特点。
5. （3）在抗虫棉培育过程中，⑤过程采用的技术是。
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1. (2024高二下·肇庆期中) 在基因工程中涉及到DNA的提取、目的基因的扩增及电泳鉴定，下列有关叙述正确的是（）

A . 利用DNA不溶于酒精、不能溶于2mol/L的NaCl溶液的性质，可进行DNA的粗提取 B . 待测样品中DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度等都会影响DNA在电泳中的迁移速率 C . 在DNA溶液中加入二苯胺试剂，混匀后在沸水浴条件下会逐渐产生砖红色沉淀 D . PCR过程中，耐高温的DNA聚合酶需先与启动子结合，继而从引物的3^'端延伸子链

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1. (2024高二下·肇庆期中) 人乳铁蛋白（hLTF）是一种铁结合的糖蛋白、具有抑菌、提高免疫力等重要功能。研究者通过转基因技术培育能生产hLTF的奶牛，从牛奶中分离提纯hLTF，回答下列问题。
1. （1）从原核生物中获取的质粒不适用于直接构建真核生物的表达载体，其启动子需要进行替换才有可能在真核细胞中表达，主要原因是。
3. （2）研究人员采用小鼠乳清酸蛋白基因的启动子和终止子来替换pA质粒中的部分序列，再拼接hLTF基因，最终形成pW2-hLTF重组质粒，过程如下图：
  科学家常用PCR特异性地快速扩增目的基因，其原理是。
  PCR扩增过程中每次循环一般可分为。在扩增小鼠乳清酸蛋白基因的启动子、终止子和hLTF基因时，均需引入限制酶的识别序列和切割位点，以便剪接到质粒的指定位置。据图分析，PCR扩增小鼠乳清酸蛋白基因的启动子所需的两种引物应分别包含（限制酶）的识别序列。
5. （3）构建基因表达载体过程中，将修饰后的hLTF基因插入重组质粒的启动子和终止子之间后，不一定能获得所需要的基因表达载体，原因是。
7. （4）经检测筛选所获得的基因表达载体pW2-hLTF通过的方法导入到奶牛的受精卵细胞中，以获得能产生hLTF的转基因奶牛。
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1. (2024高二下·肇庆期中) 从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是（）

A . 合成编码目的肽的DNA片段 B . 构建含目的肽DNA片段的表达载体 C . 依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽 D . 筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽

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