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1. (2024高二下·封开期中) 下列关于“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述中，正确的是( )

A . 用鸡血作为材料，原因是鸡血红细胞有细胞核，其他动物红细胞没有细胞核 B . 用不同浓度的NaCl溶液进行DNA粗提取，原因是DNA在其中溶解度不同 C . 用酒精进行提纯，原因是DNA溶于酒精，蛋白质不溶于酒精 D . 用二苯胺试剂进行鉴定，原因是DNA溶液中加入二苯胺试剂即呈蓝色

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1. (2024高二下·封开期中) 下列有关基因工程的叙述，错误的是（）

A . DNA连接酶可将两个游离的脱氧核苷酸通过磷酸二酯键连接 B . 通常采用抗生素抗性基因作为标记基因检测目的基因是否导入 C . 质粒作为常见的载体，是在天然质粒的基础上进行人工改造的 D . 通常选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌细胞繁殖快

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1. (2024高二下·肇庆期中) 用氨苄青霉素抗性基因（Amp^R）、四环素抗性基因（Tet^R）作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是（　　）

A . 若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同 B . 若用PvuⅠ酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因 C . 若用SphⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D . 若用SphⅠ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落

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1. (2024高二下·肇庆期中) 从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是（）

A . 合成编码目的肽的DNA片段 B . 构建含目的肽DNA片段的表达载体 C . 依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽 D . 筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽

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1. (2024高二下·常平期中) 新冠病毒通过表面刺突蛋白（S蛋白）的活性域（RBD）与人体细胞表面的ACE2受体相互作用感染细胞。科学家设计了一种自然界中不存在的蛋白质LCB1，可与S蛋白的RBD紧密结合，以干扰新冠病毒的感染。下列叙述不合理的是（）

A . 生产LCB1用到了基因工程的操作技术 B . 可直接从细胞中获取基因用于LCB1的生产 C . LCB1的结构可能与S蛋白的抗体有相似之处 D . S蛋白的RBD结构可以为设计LCB1提供信息

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1. (2024高二下·常平期中) 科学家利用蛋白质工程技术将水蛭素（一种可用于预防和治疗血栓的蛋白质）第47位的天冬酰胺替换为赖氨酸，显著提高了它的抗凝血活性，流程图如下。已知天冬酰胺对应的密码子为AAU、AAC，赖氨酸对应的密码子为AAA、GUA等。下列叙述错误的是（　　）

A . 上图的操作流程是从预期的水蛭素功能出发的 B . 在这项替换研究中目前可行的直接操作对象是基因 C . 上图中大分子物质a和b的单体序列均是唯一的 D . 用蛋白质工程可生产基因工程所不能生产的蛋白质

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1. (2024高二下·常平期中) 炎症性肠病（IBD）是一种易导致结肠癌的慢性疾病，患者肠道内会产生硫代硫酸盐。科研人员以小鼠为研究对象，建立了下图所示的炎症性肠病检测模型，GFP基因是绿色荧光蛋白基因。
1. （1）据图分析，可以通过检测荧光强弱来判定小鼠肠道内硫代硫酸盐的浓度，其原因是。
3. （2）研究者利用基因工程技术构建含硫代硫酸盐检测传感器的大肠杆菌工程菌，通过PCR扩增R基因时应该选择的引物是，在A、B两端引物的5^'端需添加的限制酶识别序列为和。
  限制酶识别序列和酶切位点如下表：
  限制酶
  HindⅢ
  BamHⅠ
  PstⅠ
  EcoRⅠ
  BglⅡ
  识别序列（5^'→3^'）
  A↓AGCTT
  G↓GATCC
  C↓TGCAG
  G↓AATTC
  A↓GATCT
5. （3）研究发现患者肠道内硫代硫酸盐的生成量与疾病严重程度呈正相关。为简化疾病诊断和精确用药，科研人员开发了智能工程菌。科研人员将抗炎蛋白基因与硫代硫酸盐特异性诱导激活的启动子P连接，构建出下图所示表达载体（部分片段），导入用处理的大肠杆菌细胞内，选用启动子P的优点是。
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1. (2024高三下·广西模拟) Ti质粒上有vir区和T-DNA区，vir区决定T-DNA的转移。研究人员将vir区和T-DNA区分离，开发了包括微型Ti质粒和辅助Ti质粒的双元载体系统。利用该系统，将抗草甘膦基因（cp）导入大豆中，培育抗除草剂（草甘膦）的转基因大豆。回答下列问题：
1. （1）双酶切可将cp基因以正确方向插入微型Ti质粒。已知cp基因的a链为转录的模板链，则引物1和引物2的5'端应分别加入酶和酶的酶切位点。
3. （2）目的基因表达载体过大时难以操作，转化效率较低。研究人员在构建微型Ti质粒时删除了生长素基因和细胞分裂素基因，这样做的优点是（答出2点）。T-DNA从农杆菌转移到植物细胞中时始于右边界止于左边界，在T-DNA的转移过程中会出现不完整转移现象，若以绿色荧光蛋白基因（GFP）作报告基因研究T-DNA的转移，则GFP应构建在紧临（填“左”或“右”）边界的位置。
5. （3）将微型Ti质粒上重组了cp基因的农杆菌与含辅助Ti质粒的农杆菌混合，一定温度下保温一段时间，得到含双元载体的农杆菌。在含双元载体的农杆菌中，辅助Ti质粒的作用是。
7. （4）用含有cp基因表达载体的农杆菌侵染大豆愈伤组织，筛选出转cp基因的愈伤组织。诱导愈伤组织形成试管苗的过程，在植物组织培养中叫阶段。此阶段需要更换新的培养基，是因为。
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1. (2024·广西模拟) 葡萄酒中的氨基甲酸乙酯（EthylCarbamate，EC）是一种潜在致癌物，主要由尿素和乙醇反应生成。通过在亲本酿酒酵母菌株中，敲除一个拷贝的精氨酸酶基因CAR1，同时选用强启动子PGK1过表达脲基酰胺酶基因DUR1、2，来获得低产EC的重组酿酒酵母菌株。与亲本菌株相比，重组酿酒酵母菌株发酵性能及风味物质不受影响，尿素和EC的含量分别降低了40.38%和34.45%。满足葡萄酒相关领域对酵母的较高要求，有广泛的应用前景。
1. （1）下图为目的基因脲基酰胺酶基因DUR1、2的部分序列：
  模板链3'-TACTGTCAATCA……ATGACGGCCACT-5'
  编码链5'-ATGACAGTTAGT……TACTGCCGGTGA-3'
  利用PCR扩增目的基因应选择的一对引物是____。
3. （2）如图所示，构建基因表达载体时为避免反向拼接应选择（填写酶的具体名称）识别并切割质粒，再用DNA连接酶连接。氨苄青霉素抗性基因的作用是。
5. （3）已知目的基因上无相关酶切位点，应在引物的（填5'或3'）端设计酶切序列，目的基因上游设计的酶切序列+引物序列为5'--3'。
7. （4）已知DUR1、2基因的转录模板链为A链，如果采用一定方法将目的基因与质粒进行反向连接，构建出反义DUR1、2基因，则其转录模板链为链。将其导入之前的转基因工程菌中，其结果无法获得低EC产品，推测其原因可能是。
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1. (2024高二下·高州期中) 重组人血小板生成素（rhTPO）是一种新发现的造血生长因子，下图为科学家通过培育出转基因山羊生产rhTPO的过程。其中编号①-⑨表示过程，A表示含有rhTPO基因的DNA，四种限制性内切核酸酶的识别序列及切割位点见下表，请回答下列问题：
限制酶
BglⅡ
BamHI
HindⅢ
XbaI
识别序列和切割位点
G↓GATCC
A↓GATCT
A↓AGCTTT
↓CTAGA
1. （1） ②过程需要的限制性内切核酸酶是（从题干表格中选取）。为了使目的基因能够表达，构建重组质粒时，目的基因的上游必须有，其为酶的识别和结合部位。
3. （2）体外受精时需要将卵母细胞培养至期。将重组质粒导入受精卵的方法是。
5. （3）为使受体母羊更好的接受植入的胚胎，需提前对其进行处理；培育转基因羊的过程，用到的胚胎工程技术有（写出两种）。
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限制酶	HindⅢ	BamHⅠ	PstⅠ	EcoRⅠ	BglⅡ
识别序列（5^'→3^'）	A↓AGCTT	G↓GATCC	C↓TGCAG	G↓AATTC	A↓GATCT

限制酶	BglⅡ	BamHI	HindⅢ	XbaI
识别序列和切割位点	G↓GATCC	A↓GATCT	A↓AGCTTT	↓CTAGA