高中生物学-手动组卷-二一组卷网

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1. (2024高三下·内江月考) 为使玉米获得抗除草剂性状，科研人员进行了相关操作（如图所示）。含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达，其正确表达产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。回答下列问题：
1. （1）为获取大量除草剂抗性基因G的拷贝，一般采用技术进行扩增，扩增时，冷却至55～60℃的目的是。在用除草剂抗性基因G与Ti质粒构建基因表达载体的过程中，用到的工具酶有。
3. （2）将含除草剂抗性基因G的重组Ti质粒转入农杆菌，为提高基因表达载体进入农杆菌的效率，需要用Ca²⁺处理细胞，其目的是。在“筛选1”中含氨苄青霉素的培养基能将成功导入表达载体的农杆菌筛选出来，而含无色物质K的培养基却不能，原因是。
5. （3）利用进行筛选2，更易于获得抗除草剂的转基因植株。从步骤①到步骤②需要更换新的培养基，原因是。
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1. (2024高三下·湖南月考) 在未断奶的小牛胃中存在一种凝乳酶，被广泛应用于奶酪和酸奶的生产。科学家将编码牛凝乳酶的基因(长度1.5kb)导入大肠杆菌获得工程菌，再通过工业发酵批量生产凝乳酶。
1. （1）提取小牛胃黏膜组织中的mRNA，经逆转录得到cDNA，选择合适的引物进行PCR扩增，PCR引物碱基数一般在20～30个之间，过短则导致。
3. （2）如表为操作过程中可能用到的限制酶，图1为获得的目的基因及末端(除黏性末端序列外，其他碱基序列省略)，图2为要使用的质粒，其中的Tet'、Amp'分别为四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因。对质粒进行切割时，选用的两种限制酶为。目的基因和质粒能连接成重组质粒的原因是，导入的目的基因在变体细胞中能成功表达的理论基础是。
  限制酶 BamHⅠ BclⅠ SmaⅠ Sau3AⅠ
  识别位点及切割位点 -G↓GATCC- -T↓GATCG- -CCC↓GGG- -↓GATC-
5. （3）将转化后的大肠杆菌接种在含的培养基上进行培养，随机挑取菌落(分别编号为1、2、3、4)培养并提取质粒，用(2)中选用的两种限制酶进行酶切，酶切产物经电泳分离，结果如图，号菌落的质粒很可能是含目的基因的重组质粒。
  注：M为指示分子大小的标准参照物；小于0.2kb的DNA分子条带未出现在图中
7. （4）已知凝乳酶第20、24位氨基酸变成半胱氨酸，其活性可显著提高。科研人员希望运用蛋白质工程技术获得活性更强的凝乳酶，请选用合适的措施编号并排序：(用箭头表示)
  ①重组DNA分子导入大肠杆菌
  ②随机改变凝乳酶基因的序列
  ③分析突变蛋白功能，设计结构
  ④改变凝乳酶基因的特定序列
  ⑤培养细胞后提纯突变蛋白
  ⑥将改变后的凝乳酶基因与质粒重组
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1. (2024高三上·娄底月考) 野生玉米“大刍草”经过9000多年人工驯化，被改造成现代玉米。我国中科院科学家经过不懈努力，从野生玉米中成功找回玉米人工驯化过程中丢失的一个控制高蛋白含量的优良基因THP9，克隆出来并将此高蛋白基因转移到玉米细胞内，获得了转基因高蛋白玉米新品种。构建基因表达载体时，若科研人员需将THP9基囚整合到质粒上（如图）。回答下列问题：
EcoRⅠ
BamHⅠ
KpnⅠ
MfeⅠ
HindⅢ
1. （1）扩增优良基因THP9使用技术，依据的原理是，扩增时，需在耐高温的DNA聚合酶催化下，在引物端进行DNA链的延伸。
3. （2）构建基因表达载体时，为获得能正确表达THP9基因的重组质粒，具体操作是。
5. （3）采用农杆菌转化法将优良基因THP9导入玉米细胞中，在含氨苄青霉素的培养基上培养获得的菌落不一定含有重组质粒，原因是。将新鲜的玉米叶片上取下的圆形小片与农杆菌共同培养，筛选转化细胞并培育成转基因植株。欲从个体水平检测转基因玉米是否培育成功，实验方法是。
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1. (2024高三上·长沙期末) 像BclI(—T↓GATCA—)、BglⅡ(—A↓GATCT一)、Mbo I(—↓GATC一)这样，识别序列不同，但能产生相同黏性末端的一类限制酶被称为同尾酶。如图表示目的基因及质粒上的酶切位点。选用不同的限制酶对质粒和目的基因进行切割，并用DNA连接酶进行连接。下列分析错误的是（）

A . A B . B C . C D . D

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1. (2024高三下·云安月考) 基因工程的发展离不开理论的突破和技术的创新。下列科学研究体现了基因工程正式问世的是（）

A . 艾弗里等人通过肺炎链球菌的体外转化实验证明DNA可以转移 B . 沃森和克里克建立了DNA双螺旋结构模型并提出自我复制假说 C . 科学家利用质粒构建重组DNA载体并导入受体细胞中成功表达 D . 科学家发现了多种限制性内切核酸酶、DNA连接酶和逆转录酶

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1. (2024高二下·南海月考) 像BclⅠ（-T↓GATCA-）、BglⅡ（-A↓GATCT-）、MboⅠ（-↓GATC-）这样，识别序列不同、，但能产生相同的黏性末端的一类限制酶被称为同尾酶。如图表示目的基因及质粒上的酶切位点。选用不同的限制酶对质粒和目的基因进行切割，并用DNA连接酶进行连接。下列分析错误的是（）

选项	切割质粒	切割目的基因	结果分析
A	BclI和BglⅡ	BclI和BglⅡ	形成的重组质粒的碱基排列顺序不一定相同
B	BclI和BglⅡ	MboI	切割后的质粒不可自我环化，切割后的目的基因可以自我环化
C	MboI	BclI和BglⅡ	形成的重组质粒可被MboI再次切开，但可能无法被BclI和BglⅡ再次切开
D	MboI	MboI	切割后的质粒可以自我环化，切割后的目的基因也可以自我环化

A . A B . B C . C D . D

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1. (2024高三下·平江开学考) 用氨苄青霉素抗性基因（Amp^R）、四环素抗性基因（Tet^R）作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是（　　）

A . 若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同 B . 若用PvuⅠ酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因 C . 若用SphⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D . 若用SphⅠ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落

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1. (2024高三下·武汉开学考) 图1表示DNA的平面结构示意图，图2表示某种限制酶的识别序列和作用位点，下列相关说法正确的是（）

A . 图1中a所示部位即图2中箭头所示部位 B . 图2所示的DNA片段被限制酶切割后获得的末端形式与图1下端相同 C . E▪co1iDNA连接酶可以将两个图1所示结构连接成为一个DNA片段 D . 基因工程的载体必须具有图2所示的碱基序列

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1. (2024高三下·衡阳开学考) “中天杨”是由我国科学家采用生物转基因技术，历经8年时间培育成功的抗盐碱、耐干旱的杨树新品种。该品种以八里庄杨为实验材料，经转mtl-D基因培育获得。如图为培育“中天杨”的操作流程，①~⑥表示操作过程，该过程中可能用到的限制酶如表所示。回答下列问题。
注：Ti质粒中的Tet^r为四环素抗性基因，Amp^r为氨节青霉素抗性基因。
限制酶
BclⅠ
EcoRⅠ
XbaⅠ
Sau3AⅠ
BamHⅠ
切割位点
T↓GATCA
G↓AATTC
T↓CTAGA
↓GATC
G↓GATCC
1. （1）与杂交育种相比，基因工程育种的优点有(填序号)。
  ①操作方法简便②目的性强，能定向改造生物性状③育种周期短④不受生殖隔离限制，能克服远缘杂交不亲和障碍⑤安全性高，对生态没有威胁
3. （2）过程①需要的酶是，过程②需要的工具酶是。
5. （3）采用PCR技术扩增目的基因时，在PCR反应体系中需加入引物，引物的作用是，若目的基因扩增3代，则共用引物个。PCR完成以后，常采用法来鉴定PCR的产物。
7. （4）培育转基因杨树的核心工作是，在进行该工作时，应在mtl-D基因的两侧添加限制酶的识别序列。
9. （5）将目的基因导入受体细胞除图示方法外，还有。为了确认目的基因在植物细胞中是否成功表达，从分子水平通常使用法进行检测。
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1. (2023高三上·遵义月考) 生物钢的强度比钢的强度大4~5倍，但有蚕丝般的柔软和光泽，可用于制造高级防弹衣。科学家从蜘蛛中获取蜘蛛丝蛋白基因并将其植入山羊体内，让羊奶含有蜘蛛丝蛋白，再利用特殊的纺丝程序，将羊奶中的蜘蛛丝蛋白纺成丝。回答以下问题：
1. （1）图1表示蜘蛛丝蛋白基因及利用PCR技术扩增该基因时可能用到的引物。
  ①将蜘蛛丝蛋白基因的mRNA逆转录，再进行PCR可获得蜘蛛丝蛋白基因，整个过程中所需要的酶是，所需要的原料是。
  ②据图1分析，通过PCR获得蜘蛛丝蛋白基因时所选择的引物是，加入这两种引物的作用是。
3. （2）为获得多只能产含有蜘蛛丝蛋白的羊奶的转基因山羊，相关流程如图2所示。
  ①A步骤中将蜘蛛丝蛋白基因的表达载体导入甲羊的受精卵中常用法。
  ②一般情况下，C步骤中选择乙羊的供体细胞来进行核移植时，有胚胎细胞和体细胞的细胞核可供选择，前者进行核移植的难度明显后者的，原因是。
  ③G步骤中，可采用胚胎分割技术来提高早期胚胎的利用率，该过程中应选择发育良好、形态正常的胚。
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限制酶	BamHⅠ	BclⅠ	SmaⅠ	Sau3AⅠ
识别位点及切割位点	-G↓GATCC-	-T↓GATCG-	-CCC↓GGG-	-↓GATC-

限制酶	BclⅠ	EcoRⅠ	XbaⅠ	Sau3AⅠ	BamHⅠ
切割位点	T↓GATCA	G↓AATTC	T↓CTAGA	↓GATC	G↓GATCC

EcoRⅠ	BamHⅠ	KpnⅠ	MfeⅠ	HindⅢ