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1. (2023高二下·南岗期末) a₁-胰蛋白酶缺乏症是北美常见的一种单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡。利用基因工程技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人a₁-抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更容易获得这种酶。下列关于该过程的叙述中错误的是（）

A . 载体上绿色荧光蛋白基因（GFP）的作用是便于筛选含有目的基因的受体细胞 B . 将目的基因导入羊受精卵中，可以使用显微注射法 C . 培养出的转基因羊的所有细胞中都含有该目的基因，故该羊有性生殖产生的后代也都能产生a₁-抗胰蛋白酶 D . 目的基因与载体重组过程需要DNA连接酶的催化作用

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1. (2023高二下·宝鸡期末) 研究人员用三种基因探针，对某转基因奶牛的乳腺细胞口腔上皮细胞、蹄部细胞中提取的mRNA进行分子杂交，结果如下表所示。下列叙述中错误的是（）

探针	乳腺细胞	口腔上皮细胞	蹄部细胞
乳腺蛋白基因探针	出现杂交带	未出现杂交带	未出现杂交带
人干扰素基因探针	出现杂交带	出现杂交带	出现杂交带
胰岛素基因探针	未出现杂交带	未出现杂交带	未出现杂交带

A . 人干扰素基因可在转基因奶牛的多种体细胞中表达 B . 可用mRNA逆转录产生的DNA制作相应基因的探针 C . 用上述探针分别检测三种细胞的DNA，都会出现杂交带 D . 胰岛A细胞中的mRNA能与胰岛素基因探针形成杂交带

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1. (2023高二下·宝鸡期末) 科学家将人的生长激素基因插入小鼠基因组内制成膀胱生物反应器，使小鼠膀胱可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。下列叙述中正确的是（）

A . 利用膀胱生物反应器生产人的生长激素属于蛋白质工程的应用 B . 选择小鼠膀胱组织细胞作为人的生长激素基因的受体细胞从而将该基因导入小鼠基因组 C . 转基因小鼠中，人的生长激素基因只存在于膀胱上皮细胞中 D . 只在小鼠细胞中检测到人的生长激素基因，不能说明该技术已获得成功

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1. (2023高二下·宝鸡期末) 转基因抗虫棉的培育，番茄—马铃薯的创造，单克隆抗体的制备，同卵双胎依次所属的生物工程技术为（）

A . 基因工程、胚胎工程、细胞工程、基因工程 B . 细胞工程、细胞工程、胚胎工程、细胞工程 C . 基因工程、细胞工程、细胞工程、胚胎工程 D . 细胞工程、基因工程、基因工程、胚胎工程

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1. (2023高二下·宝鸡期末) 下列有关基因工程及其应用的相关叙述，错误的是（）

A . 基因工程育种能够定向改造生物性状 B . DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键 C . 可利用转基因细菌降解有毒有害的化合物 D . 转基因技术能够使植物体表达动物蛋白

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1. (2023高一下·乐山期末) 我国科学家将含有人凝血因子基因的DNA片段注射到羊的受精卵中，由该受精卵发育而成的羊，分泌的乳汁中含有人的凝血因子，可用于治疗血友病。下列叙述错误的是（）

A . 这项研究说明人和羊共用一套遗传密码 B . 该羊的乳腺细胞中含有人的凝血因子基因 C . 该羊分泌的乳汁中含有人的凝血因子基因 D . 该羊的后代也可能含有人的凝血因子基因

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1. (2023高二下·绍兴期末) 铁皮石斛作为一种重要中药材，在市场上的需求较大，具有极强的经济价值、营养价值和药用价值，但在人们长期掠夺式采挖与生存条件的破坏下，野生资源濒临灭绝，药材价格不断攀升，而且采摘后在常温下容易腐烂。某科研小组利用农杆菌介导的转化法培养转基因脱毒苗，可增加铁皮石斛的有益成分表达水平，还能增强其抗病菌能力减少腐烂。回答下列问题：
1. （1）农杆菌的活化培养：
  挑取农杆菌于（填“液体”或“固体”）培养基中活化并培养，培养基中含有0.5%氯化钠，其作用是。
3. （2）侵染石斛茎尖：
  外植体宜选用茎尖而不选用叶片的原因是，接种前对外植体用酒精消毒后，需要用清洗10min。对其进行适当的切割处理后浸入农杆菌侵染液，切割处理的目的是。
5. （3）共培养：
  侵染结束后，用滤纸吸干茎尖上多余侵染液，然后迅速将茎尖转移至共培养基培养，培养基中的蔗糖的作用是。将其培养后的茎尖冲洗后，再用适宜浓度的头孢类抗生素溶液清洗1-2min，该过程中使用头孢类抗生素的作用是。
7. （4）植株再生：
  将茎尖用滤纸吸干水分，迅速接种于发芽培养基中培养获得丛状苗后，再转入培养基中培养至组培苗，然后要进行后移栽定植。植物组织培养常用到发芽培养基和生根培养基，在设计这两种培养基时最主要的区别是。
9. （5）致腐菌的快速检验：
  在生产实践中，可通过PCR反应快速检测铁皮石斛中的致腐菌。在检测过程中，要根据致腐菌特殊基因两端的碱基序列设计引物，下图为致腐菌特殊基因的结构示意图，与之对应的引物结合的部位是（用图中字母作答）。
  
  若已知该基因的引物I，能否依据其碱基序列设计出另一种引物Ⅱ？。理由是。
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1. (2023高二下·绍兴期末) 人类是乙肝病毒的唯一宿主，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。下图为乙肝病毒基因工程疫苗的生产和使用流程，质粒中LacZ基因可使细菌能够利用加入培养基的物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色，若无该基因，菌落则呈白色。下列有关叙述正确的是（）

A . 过程①最好的限制酶选择方案是BamHI和EcoRV B . 质粒用限制酶BamHI和EcoRV切割后产生4个游离的磷酸基团 C . 过程②需要在培养基中加青霉素和X-gal以筛选蓝色的大肠杆菌菌落 D . 基因工程疫苗不会出现病毒的增殖和感染，安全性高

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1. (2023高二下·肇庆期末) 乳腺生物反应器是将外源基因定位表达于哺乳动物的乳腺中，通过转基因动物分泌的乳汁来生产重组蛋白，例如，生产可用于治疗血液病、创伤性出血等疾病的重组人凝血因子Ⅶ(rhFⅦ)。请回答下列问题：
1. （1）为获得人凝血因子，首先要从细胞中获取总RNA，通过获得cDNA，再进行PCR获得人凝血因子基因。该方法获得的基因不具有(答出1点即可)等。PCR技术需要设计引物，引物的作用是。
3. （2）人凝血因子cDNA中不含限制酶识别序列，无法直接构建基因表达载体，因此，在PCR时需要在引物上加入限制酶的识别序列，应加在引物的(填"3'"或"5'"）端才能不影响PCR的顺利进行。PCR需要两种引物，最好在这两种引物上各自加装填"相同"或者"不同"）的限制酶识别序列，从而避免目的基因自身环化。
5. （3）膀胱生物反应器与乳腺生物反应器的优点相同：收集产物蛋白比较容易，不会对动物造成损伤。此外，膀胱生物反应器还具有的显著优势在于不受转基因动物的(答出2点即可）限制，而且从尿液中提取蛋白质比从乳汁中提取更简便、高效。
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1. (2023高二下·嘉兴期末) 一些细菌在长期进化过程中形成一种免疫机制，称为CRISPR/Cas系统，可用来清除入侵的外源DNA，具体过程如下图。其中，细菌CRISPR序列的间隔区可以储存入侵过的外源DNA信息，当相同外源DNA再次入侵时，gRNA能特异性识别其中的靶序列。美国昆虫学家尝试利用CRISPR/Cas9对蚊子进行基因编辑从而产生显性不育基因，使蚊子受精卵不能发育为成体，达到控制蚊子数量的目的。

回答下列问题
1. （1）图中CRISPR序列指导合成gRNA（向导RNA）的过程称，gRNA通过与外源DNA的碱基互补，从而识别外源DNA，进而引导Cas9（Cas9蛋白）切割核苷酸之间的。
3. （2）下列关于CRISPR/Cas机制的叙述中，正确的是哪几项?（A．gRNA与外源DNA相结合的片段中最多含有5种核苷酸B．CRISPR位点使细菌具有类似二次免疫的特点C．间隔区储存的序列越多样，细菌免疫能力越强D．根据CRISPR/Cas原理可对某些基因进行“基因敲除”）。
5. （3）基因编辑改造蚊子的步骤包括下列5步，其先后顺序是（用序号回答）。
  ①合成Cas9/gRNA复合物，对目的基因进行编辑
  ②蚊子的基因组进行测序，确定与生殖发育有关的基因
  ③实验室条件筛选出不育的转基因蚊子
  ④合成能与目的基因所对应的gRNA
  ⑤将转基因蚊子释放到野外发挥作用
7. （4）研究发现，雌蚊一生只能交配1次，而一只雄蚊可以与不同的雌蚊交配。据此应对（填“雌蚊”或“雄蚊”）进行基因编辑。
9. （5）利用CRISPR/Cas9系统进行基因编辑的技术中，构建“显性不育基因”这种变异属于。（填“基因突变”、“基因重组”或“染色体畸变”）。
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