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1. 2023年9月 20日，全球第二例转基因猪心脏成功移植到人体。该转基因猪是通过成纤维细胞克隆培养的，体内10多个基因经过了编辑。下列相关叙述错误的是（）

A . 需利用基因编辑技术敲除猪成纤维细胞内引起人体免疫排斥有关的基因 B . 将编辑后的猪成纤维细胞核移植到猪去核卵母细胞中并用电刺激促进融合 C . 融合后的重组细胞需要在 CO₂培养箱中完成早期胚胎培养 D . 挑选发育良好的原肠胚移植到同期发情的母猪体内继续发育直至分娩

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1. 透明质酸(HA)又称玻尿酸，是一种具有高黏度氨基多糖，也是重要的医学材料和化妆品添加原料。枯草芽孢杆菌无透明质酸合成酶(HAS)，但含有 HA代谢的其它途径，而动物病原体链球菌含有HAS的基因(H基因)。研究者通过基因工程来改变枯草芽孢杆菌代谢通路，以实现枯草芽孢杆菌生产 HA。
1. （1）目的基因的获取和扩增：链球菌破碎后提取 DNA，经酶切割获取H基因。PCR扩增目的基因，需要根据H基因设计合适的引物，是由于 DNA 聚合酶发挥作用时需要引物参与形成作为核苷酸缩合作用的起点；DNA 聚合酶在延伸子链时需要把核苷酸加到端。
3. （2）表达载体的构建：下图为H基因与p质粒示意图，其中H基因以a链为转录模板链。为通过添加诱导剂来控制H基因的表达，研究者选择了含木糖诱导型启动子的p质粒。为了使下图中酶切后的H基因按照正确的方向与p质粒连接，p质粒位点1和2所对应的酶分别是。酶切后加入酶催化重组质粒形成。
5. （3）表达载体的导入与筛选：将构建好的重组质粒转入经处理的枯草芽孢杆菌，在含的培养基上筛选，得到枯草芽孢杆菌A。
7. （4）菌种的扩大培养：配制(填“液体”或“固体”)培养基，成分有水、无机盐、蛋白胨和酵母提取物，其中蛋白胨为微生物生长主要提供；调整 pH；灭菌；枯草芽孢杆菌 A 接种到摇瓶培养。
9. （5）大型发酵：进行现代工业发酵时，在发酵罐加入适宜的培养基外，还需严格控制等发酵条件。经扩大培养的枯草芽孢杆菌A 接种定时间后添加，诱导合成HA。HA 对枯草芽孢杆菌来说属于(填“初生代谢产物”或“次生代谢产物”)。
11. （6）产品输出：发酵液中大部分为水，发酵产物浓度较低；发酵液中悬浮固形物主要是菌体和蛋白质的胶状物，故最后对发酵产物进行，获得所需产品。
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1. (2023·宁波模拟) 盐碱胁迫下植物应激反应产生的H₂O₂对细胞有毒害作用。禾本科农作物AT1蛋白通过调节细胞膜上PIP2s蛋白磷酸化水平，影响H₂O₂的跨膜转运（PIP2s蛋白质磷酸化可为物质转运提供能量），如图所示。下列叙述错误的是（）

A . Gβ与AT1蛋白结合，能抑制PIP2s蛋白的磷酸化 B . 细胞膜上PIP2s蛋白磷酸化是提高H₂O₂外排能力所必需的 C . 增强AT1基因表达可提高禾本科农作物的耐盐碱能力 D . 从特殊物种中发掘逆境胁迫相关基因是改良农作物抗逆性的有效途径

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1. (2023高三上·南京期中) 蛋白质甲基化是最广泛的翻译后修饰之一，组蛋白甲基转移酶G9a主要修饰蛋白质中赖氨酸、精氨酸，从而调控基因表达。酵母细胞基因转录因子GAL4－BD（含赖氨酸）和GAL4-AD两结构域结合时才能激活转录。为了筛选赖氨酸甲基化阅读器(甲基化的赖氨酸是“阅读器”的识别、结合位点)，研究人员进行了如下图1所示实验，其中TRP1、LEU2分别是色氨酸、亮氨酸合成基因，G9a－SET基因表达产物（含G9a）能与GAL4－BD基因表达产物结合。当赖氨酸甲基化阅读器与G9a－SET－GAL4－BD复合体相互作用后，GAL4－BD和GAL4-AD一起激活报告基因LacZ转录（如下图2），LacZ表达产物能将无色化合物X-gal水解成蓝色化合物。请回答下列问题：
1. （1）组蛋白甲基化影响基因表达水平，并可遗传给后代，这属于现象。
3. （2）通过PCR技术扩增“阅读器”基因时，引物设计的质量是决定PCR成功与否的关键。首先从核酸数据库中获得“阅读器”基因的编码序列，然后在引物5′端添加的碱基序列为，其目的是。
5. （3）图3为PCR过程的程序参数，在PCR反应体系配制完成后，先冰上预冷，等程序设置完毕后再放入PCR仪中，这种“预冷”处理的优点有。Step1和Step8的主要目的分别是。由于Step3引物含有，不能和模板完全匹配，所以Step3的温度比Step6要低一点。
7. （4）质粒a、b导入代谢缺陷酵母菌时，需用醋酸锂(LiAC)处理酵母菌，其目的是使酵母菌细胞处于一种。两培养基中需分别不添加才可筛选出导入重组质粒的酵母菌。与体外扩增相比，将质粒导入酵母菌扩增的优点有。
9. （5） Y2H和Y187接合生殖、培养时，培养基中添加X-gal，菌落呈色的接合子Y3H中含所需的“阅读器”。
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1. (2023高三上·保定期中) 对果树进行矮化栽培可提高经济效益，下列相关叙述错误的是（）

A . 矮化果树分配至营养器官的光合产物减少，有利于果实增产 B . 利用基因工程导入矮化基因，可选择体细胞作为受体细胞 C . 对果树进行“打顶”去除其顶端优势，可培育矮化植株 D . 对果树幼苗施加适宜浓度的赤霉素，可培育矮化植株

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1. (2023高三上·济南开学考) 某研究机构通过研究发现，植物害虫烟粉虱通过水平基因转移过程获取所捕食植物中的遗传物质，比如可将番茄的酚糖酰基转移酶基因（BtPMaT1）整合到了自己的基因组后，BtPMaT1表达出的酚糖酰基转移酶使烟粉虱将摄入的酚糖（番茄的次生代谢产物）分解，避免烟粉虱中毒死亡。科研人员利用细胞中dsRNA调控烟粉虱BtPMaT1表达的相关作用机制，如图1所示。培育了一种转基因番茄，该种番茄中转入能表达双链RNA的烟粉虱BtPMaT1基因，培育过程如图2所示。该种转基因番茄可以有效控制存在BtPMaT1基因烟粉虱的数量。回答下列问题：
1. （1）烟粉虱通过BtPMaT1水平基因转移而获得的中和酚糖新性状的来源属于。除此以外，研究发现一些位于质粒、噬菌体等结构的基因可通过水平基因转移扩散到其他物种中并表达，水平基因转移实现表达的基础是。
3. （2） dsRNA可以防治烟粉虱的原因是，该种防治对于生态环境相对友好，理由是。
5. （3）在利用转基因番茄再次验证烟粉虱BtPMaT1基因的功能过程中，科研人员根据与Bt-PMaT1基因的mRNA互补的非编码RNA设计上游引物为5'CCCTCGAGTCTGCAGA-CATGGAGACGAC3'，下游引物为5'GAAGATCTTACAGCCAAACACGCAGTTC3'。供选择的限制酶共四种，如表所示。
  
  BamHⅠ
  
  BglⅡ
  
  XhoⅠ
  
  SalⅠ
  
  5'G↓GATCC3'
  
  5'A↓GATCT3'
  
  5'G↓TCGAG3'
  
  5'G↓TCGAC3'
  
  应选择酶切割PCR产物和载体，构建基因表达载体。选用双酶切法切割目的基因和载体的原因是。
7. （4）为确定转基因番茄防治烟粉虱的效果，科研人员进行了相关实验。实验过程中首先检测了BtPMaT1基因的表达水平，其目的是。然后将BtPMaT1基因干扰成功的烟粉虱接种到番茄叶片上，统计烟粉虱的成活率。
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1. (2023高一上·济南月考) 《生物学通报》2022年第12期登载文章《光合作用及其模拟技术在人类疾病治疗中的应用》，介绍了光合作用模拟及蓝藻基因工程改造在心脏病、肿瘤、糖尿病慢性伤口愈合和中风等缺氧疾病治疗中的应用。心脏病、肿瘤等疾病的共同点是缺氧引起的组织损伤，而伤口在治疗过程中也容易造成氧缺乏。蓝藻是一种原核生物，其通过光合作用可降低病变组织的二氧化碳含量，并产生氧气。随着合成生物学技术的发展，对叶绿体基因组进行改造后，藻类植物还可以用来生产药物和疫苗。下列叙述正确的是（）

A . 蓝藻细胞内含有叶绿素，能将光能转化成化学能 B . 利用蓝藻生产的疫苗，可用来预防疾病，这种免疫属于非特异性免疫 C . 蓝藻与衣藻相比，主要区别是没有成形的细胞核 D . “对叶绿体基因组进行改造”所应用的技术是克隆技术

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1. (2023高三上·重庆市开学考) CRISPR/Cas9系统主要由向导RNA（SgRNA）和Cas9蛋白两部分组成，SgRNA可引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割，其机制如图所示。下列说法正确的是（）

A . Cas9蛋白相当于限制酶，切割特定基因位点的脱氧核糖和碱基之间的化学键 B . 向导RNA可以在逆转录酶的催化下合成，合成的原料包括四种核糖核苷酸 C . CRISPR/Cas9技术编辑基因有时会因SgRNA错误结合而出现“脱靶”现象，一般SgRNA序列越短，脱靶率越低 D . 对不同目标DNA进行编辑时，使用Cas9蛋白和不同的sgRNA进行基因编辑

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1. (2023高三上·苏州开学考) 我国科研团队为研究水稻某高产基因（OsDREB1C）的表达对其产量的影响进行了相关实验。图1为OsDREB1C基因过表达水稻（OE）构建的过程（KO）构建的部分过程。请回答下列问题：
1. （1）图1中，为保证过程Ⅰ获得的OsDREB1C基因与载体正确连接形成重组质粒，需在目的基因上游添加限制酶的识别序列；农杆菌转化愈伤组织时，用含的选择培养基筛选，通过组织培养技术获得OsDREB1C基因过表达水稻（OE）。
3. （2）图2中，sgRNA是根据序列设计的向导RNA，能准确引导Cas9蛋白切割靶基因的，从而达到定向敲除靶基因的目的。
5. （3）科研人员将OE、KO以及野生型（WT）三组水稻进行一系列实验，定期测量相关数据
  组别
  OsDREB1C基因表达情况
  N吸收、运输和利用率
  光合碳同化速率
  抽穗、开花
  产量
  OE
  +++
  +++
  +++
  更早
  ++++++
  KO
  ﹣
  +
  +
  迟
  +
  WT
  +
  ++
  ++
  早
  +++
  注：“+”的数目代表程度或数量变化
  ①采用荧光定量PCR法检测三组水稻中OsDREB1C基因的转录水平。采集样本，由总RNA通过形成的cDNA作为模板进行PCR扩增，结果显示在总cDNA模板量相等的条件下，WT的Ct值是OE的16倍（Ct值是产物荧光强度达到设定阀值时的PCR循环数），在PCR扩增30个循环的产物中，OE样品的目的产物大约是WT的倍。
  ②为研究OsDREB1C基因对N吸收、运输和利用率的影响，将三组幼苗进行低氮培养。实验前三组幼苗均需进行氮饥饿处理，其目的是。据表中数据，Os﹣DREB1C基因表达量与植株N的吸收、运输呈（填“正”或“负”）相关，这些N为水稻的暗反应所需（物质）的合成提供原料。
7. （4）进一步研究发现，OE水稻通过OsDREB1C基因的过表达，使其实现光合效率高效、氮肥高效及早熟的三重效果。
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1. (2023高三上·渭南月考) 关于“克隆羊”、“试管羊”、“转基因羊”的说法合理的是（　　）

A . 它们在形成过程中，一般都有卵细胞的参与 B . 它们的遗传物质都只来自于一个亲本 C . 它们是通过相同的生殖方式获得的 D . 在培育过程中，都用到了动物细胞培养技术、核移植技术和胚胎移植技术

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BamHⅠ	BglⅡ	XhoⅠ	SalⅠ
5'G↓GATCC3'	5'A↓GATCT3'	5'G↓TCGAG3'	5'G↓TCGAC3'

组别	OsDREB1C基因表达情况	N吸收、运输和利用率	光合碳同化速率	抽穗、开花	产量
OE	+++	+++	+++	更早	++++++
KO	﹣	+	+	迟	+
WT	+	++	++	早	+++