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1. (2024高二下·诸暨月考) 下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是（）

A . 一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B . 限制性内切酶的活性受温度影响 C . 限制性内切酶能识别和切割RNA D . 限制性内切酶可从原核生物中提取

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1. (2024高二下·定海月考) 病毒侵染植物时，植物识别外源的核酸并启动一系列的调控机制来降解病毒的RNA。研究人员改造病毒载体，使其携带目的基因cDNA后侵染植物，最终特异性降解目的基因mRNA，即病毒诱导的基因沉默技术（VIGS），RNA病毒TSWV能侵染辣椒，科研人员推测用VIGS技术沉默TSWV的N基因可使辣椒抵抗TSWV，进行如下实验。
1. （1）用改造的病毒TRV作为载体，与TSWV的N基因连接，构建重组载体TRV—N（如下图），通过农杆菌转化法导入辣椒细胞。请完善制备TRV—N的技术路线：获取N基因的mRNA→→PCR→→连接成TRV—N。
3. （2） C基因是类胡萝卜素合成关键酶的基因，当类胡萝卜素合成途径被阻断，植物出现白化现象。用上述方法构建重组载体TRV—C并导入辣椒细胞，作为构建沉默体系的对照。若辣椒出现白化表型，说明。
5. （3） TSWV侵染辣椒植株会使其叶片出现明显的褪绿、黄化斑等症状，以易感TSWV的辣椒作为实验材料，实验分组及处理如下表。
  组别
  实验处理
  第1组
  第2组
  第3组
  导入TRV—C
  +
  —
  —
  导入TRV—N
  —
  —
  +
  ？
  —
  +
  +
  注：+代表添加，—代表不添加
  ①表中“？”的处理为。
  ②为使实验结果更准确，除设置空白对照组外，还应该增加第4组，其实验处理为。
  ③观察各组辣椒叶片状态和颜色，若结果为，则说明沉默TSWV的N基因可使辣椒抵抗TSWV。
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1. (2024高二下·定海月考) 我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①～⑥表示过程，该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。请据图分析回答：
1. （1）获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是。
3. （2）进行过程①时，细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有，且在进行细胞原代培养时会出现现象。
5. （3）动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是。图中过程⑤用到胚胎移植技术，其实质是早期胚胎在条件下空间位置的转移。除图中所示外，胚胎移植技术中胚胎的来源还有（答出两点）。
7. （4）研究人员在确定去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的作用时，做了两组实验，其中A组用正常培养液培养融合细胞，B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞，实验结果如下图所示。分析实验数据可知，Kd4d的mRNA的作用是。
9. （5）科研人员发现对于灵长类动物的体细胞来说，单靠核移植本身并不足以使重构胚顺利发育成存活个体，还需要对供体细胞核进行表观遗传修饰才能开启细胞核的全能性。研究表明染色体组蛋白动态可逆地被修饰酶所改变，控制着基因的表达（如图所示）。
  ①据图分析，（）组蛋白乙酰化水平和（）组蛋白去甲基化水平有利于相关基因恢复表达，开启细胞核全能性，从而显著提高重构胚的发育率。括号内应填入的选项是。
  A．提高；提高 B．降低；降低 C．提高；降低 D．降低；提高
  ②科研人员通过设计实验验证以上观点。供选择试剂为：组蛋白去甲基化酶的mRNA、组蛋白甲基化酶的mRNA、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、生理盐水。
  实验思路：将重构胚均分为甲、乙、丙、丁四组，分别注入等量的组蛋白去乙酰化酶抑制剂、、、等量生理盐水。一段时间后分别检测各组的胚胎发育率。
  实验结果：各组的胚胎发育率丙组>甲组=乙组>丁组。
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1. (2024高二下·定海月考) 经人工诱变后，部分细菌由于某种酶被破坏，其细胞中某些化学反应不能正常进行，就形成了营养缺陷型菌株，这在工业生产上有较广阔的应用前景。以下是实验人员利用影印法初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程，请回答下列问题：
1. （1）制备如图所示的培养基除含有细菌必需的水、碳源、等营养物质外，还需要加入。
3. （2）倒平板的适宜温度是50℃左右，待平板冷凝后，要将平板倒置，这样做的目的是。
5. （3）根据用途分类，图中基本培养基属于（填“选择”或“鉴别”）培养基。
7. （4）进行过程②培养时，应先将丝绒布转印至（填“基本”或“完全”）培养基上，原因是。
9. （5）利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同，为了完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员应挑取（填“菌落A”或“菌落B”）进行接种培养，并进一步鉴定。
11. （6）科研人员用放射线处理目的菌获得两个突变株C和D，然后对突变株C和D进行实验，结果如表所示。
  接种的菌种
  一般培养基
  实验处理及结果
  C
  不生长
  添加营养物质甲，能生长
  D
  不生长
  添加营养物质乙，能生长
  C+D
  能生长
  不添加营养物质甲、乙，都能生长
  ①突变株C不能在一般培养基上生长的原因最可能是。
  ②将突变株C和D混合在一起，接种于一般培养基上，都能生长的最可能的原因是。
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1. (2024高二下·定海月考) 研究发现，胰岛素进入血液循环后容易被降解，糖尿病患者需要反复注射胰岛素才能达到治疗效果。科研人员借助蛋白质工程改变了胰岛素中的某些氨基酸，提高了胰岛素在患者体内的稳定性，延长了其作用时间。下列有关叙述错误的是（）

A . 蛋白质工程的实质是在DNA分子水平上进行设计和改造 B . 氨基酸序列的差异是影响胰岛素在患者体内是否稳定的原因之一 C . 改造胰岛素应首先从设计胰岛素基因中的脱氧核苷酸序列出发 D . 蛋白质工程难度很大与蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构有关

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1. (2024高二下·定海月考) 图为构建苘麻抗除草剂基因A重组质粒的技术流程，其中NptⅡ是卡那霉素抗性基因，GUS基因仅在真核细胞中表达，表达产物可催化底物呈蓝色。下列说法错误的是（）

A . PCR扩增A时可在引物中加入PstI和XhoI的酶切位点 B . 在培养基中添加卡那霉素初步筛选导入重组质粒的农杆菌 C . 用农杆菌转化植物愈伤组织选择呈现蓝色的组织进行培养 D . 启动子若为除草剂诱导启动子将减少细胞物质和能量浪费

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1. (2024高二下·定海月考) 2n/4n嵌合体胚胎是指用四倍体(4n)胚胎与二倍体(2n)胚胎或胚胎干细胞(ES 细胞)进行聚合，形成由二倍体和四倍体细胞组成的嵌合体。嵌合体胚胎构建的常用方法如图。通过检测发现用ES细胞经2n/4n嵌合体方法获得的克隆鼠体内均为 2n细胞来源。下列叙述错误的是（）

A . 图中受精卵是发育到MⅡ期的卵母细胞和获能的精子体外受精而形成 B . 利用显微注射法将2n的 ES细胞注射至 A 的囊胚内完成2n/4n嵌合体胚胎B的构建 C . 嵌合体胚胎 C发育到原肠胚时期可植入代孕母鼠，移植前通常对代孕母鼠作同期发情处理 D . 推测2n/4n嵌合体胚胎发育时2n和4n这两种细胞类型表现出非随机性分布的特点

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1. (2024高二下·定海月考) 下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（）

A . 过程①需要提供95%空气和5%CO₂的混合气体 B . 过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 C . 为避免代孕丙牛对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂 D . 后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定

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1. (2024高二下·定海月考) 为检测某药物X的抗癌活性，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞，使其贴壁生长，实验组加入溶于二甲基亚矾的药物X，培养 72小时后进行计数，比较实验组和对照组每个孔中细胞数目。下列有关叙述错误的是（）

A . 细胞培养液中通常需要加入血清等天然成分 B . 对照组中应加入等体积的无菌水，其他条件一致 C . 可用胰蛋白酶处理使贴壁的肝癌细胞脱落下来并进行计数 D . 若实验组细胞数远低于对照组，可初步判断此药物有抗癌效果

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1. (2024高二下·定海月考) 利用山金柑愈伤组织细胞（2n）和早花柠檬叶肉细胞（2n）进行体细胞杂交可以得到高品质、抗逆性强的杂种植株。下图是杂种植株的7组核DNA和线粒体DNA来源鉴定的结果。下列分析正确的是（）

A . 山金柑愈伤组织细胞没有细胞壁，早花柠檬叶肉细胞用酶解法去除细胞壁后就能与前者融合 B . 用灭活的病毒诱导两种细胞原生质体的融合，依赖于细胞膜的流动性 C . 可通过观察融合后细胞的颜色进行初步筛选 D . 杂种植株是四倍体，包含两种植物的遗传物质

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组别实验处理	第1组	第2组	第3组
导入TRV—C	+	—	—
导入TRV—N	—	—	+
？	—	+	+

接种的菌种	一般培养基	实验处理及结果
C	不生长	添加营养物质甲，能生长
D	不生长	添加营养物质乙，能生长
C+D	能生长	不添加营养物质甲、乙，都能生长