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高中生物学
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PCR技术的基本操作和应用
1. 科学家利用基因工程改造的大肠杆菌基因组生产人胰岛素,如图是运用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。回答下列问题:
(1) 适合作为目的基因的载体需要满足一些条件,根据基因表达载体的组成分析,图中质粒没有标出的结构是
,该结构的作用是
。
(2) 大肠杆菌内目的基因转录时,转录的模板是
(填“a链”或“b链”),目的基因表达产物没有生物学活性的原因是
。
(3) 某同学尝试用PCR扩增目的基因。PCR利用的原理是
,一次PCR一般要经历30次循环,每次循环的步骤是
。
(4) 在PCR反应体系中,主要成分有缓冲液、4种脱氧核苷酸、两种引物、
等。其中引物的作用是
。
(5) PCR的产物一般通过
来鉴定。影响DNA分子在凝胶中的迁移速率的因素有
等(例举出2点即可)。