1.  人血清白蛋白（HSA）在临床上的需求量大，由于其来源有限和有生物污染的风险，重组人血清白蛋白（rHSA），成为其重要的替代品。回答下列（一）（二）小题：

（一）途径一：基因工程结合发酵工程构建人血清白蛋白工程菌：

科研人员将HSA基因转入酵母菌细胞，获得了重组人血清白蛋白。图为酵母菌基因改造以及工业化发酵生产rHSA的过程示意图，其中I、II、III、IV是四种不同的限制酶，具各自识别的酶切位点如表所示。

限制酶	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ
识别序列及切割位点

1. （1） 随着测序技术的发展，为获取人血清白蛋白基因，可通过检索获取其编码序列，用化学合成法制备得到。将HSA基因插入质粒中时，最好选择限制酶进行共同切割。将受体酵母菌置于含有的培养基中进行筛选培养，以获得能表达HSA的细胞。重组基因表达载体中的启动子的作用是。
3. （2） 工业化发酵生产rHSA的过程一般包括菌种的选育，扩大培养、、接种、发酵、产品的分离、提纯等方面，将rHSA工程菌接种至发酵罐内进行扩增，培养过程中可定期取样并使用细菌计数板对（填“菌体”或“菌落”）进行直接计数，以评估增殖情况。发酵结束后，采用（答出2点即可）等方法获得所需的发酵产品。
5. （3） （二）途径二：基因工程结合细胞工程构建人血清白蛋白乳腺反应器
   I．采集良种供体牛的卵母细胞和精液，通过体外受精，形成奶牛受精卵；
   II．构建基因的表达载体，并将其导入奶牛受精卵，形成转基因细胞；
   III．电脉冲刺激转基因细胞促使其形成早期胚胎；IV．将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。
   ​​​​​​​实验步骤I中，在体外受精前，需要对奶牛的精子进行处理。
7. （4） 实验步骤III中当胚胎发育至囊胚阶段，取其做DNA分析来进行性别鉴定，筛选出发育状态良好的雄性胚胎进行移植。
9. （5） 实验步骤IV进行胚胎移植，其实质是。为实现这一工序，需用相应激素对受体进行处理。
11. （6） 有人提议将乳腺反应器改成膀胱反应器，请分析利用膀胱反应器比乳腺反应器产量高的原因（答出两点即可）。