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1. (2024高三下·绵阳月考) 某兴趣小组用凝胶色谱法从猪的红细胞中提取了血红蛋白，然后用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行了鉴定，得到如下图所示结果。回答下列问题。
1. （1）提取和分离血红蛋白的步骤是：样品处理→粗分离→→纯度鉴定；将分离得到的血红蛋白溶液装入透析袋中进行透析，其目的是，或用于更换样品的缓冲液。
3. （2）进行SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳时，在凝胶中加入SDS，目的是，使电泳迁移率完全取决于分子的大小。点样处应该接电压仪的极，由图示结果可知，提取样品中的相对分子质量最小，的含量最多。
5. （3）与标准样品相比，提取样品多出现了三条肽链条带，原因是。
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1. (2023高三上·长沙期末) 拟南芥体内的基因X具有多个启动子，通过一种光敏色素作为受体，对光刺激进行应答，由此选择不同的启动子并转录出长度不同的mRNA，从而表达出存在于细胞内不同位置的不同蛋白质，由此使拟南芥呈现出不同的生长状态。其相关蛋白的合成过程如下图所示。
1. （1）两种蛋白质( 填“a”或 “b”) 末端的氨基酸序列相同，该末端对应的是蛋白质的(填“ -NH₂ ” 或“-COOH”)末端。a末端是引导蛋白质被运输进入叶绿体的信号肽段。
3. （2）研究人员通过特定技术，将绿色荧光蛋白 (GFP) 的基因片段插入到基因X的特定位置，使表达出的蛋白质X①、X②能带有绿色荧光蛋白，以实现它们在细胞内的可视化，由此得到A系植株 (GFP基因不含启动子和终止子)。
  ① 根据图1，GFP基因片段应插入到基因X内字母表示的特定位置。
  ②GFP基因来自于水母等动物的细胞中，需先选择合适的限制酶将其从染色体DNA上切割下来。GFP基因两侧的碱基序列如图2所示，根据碱基序列应选择下表中的进行切割。
  限制酶
  识别序列
  BamHI
  G↓GATCC
  CCTAG↑G
  HindIII
  A↓AGCTT
  TTCGA↑A
  Notl
  G↓CGGCCGC CGCCGGC↑G
  EcoRI
  G↓AATTC
  CTTAA↑G
  ③酶切前需对GFP基因进行PCR扩增，b侧所用引物已经确定， a侧引物需在以下4种中进行选择。根据a侧序列应选择不选其他3种的理由是。在PCR仪中完成4个循环后，含有该引物的DNA片段数为个。
  引物1：5'ATCCTGCTA3’
  引物2：5'TATGGATCC3’
  引物3：5GGATCCATA3’
  引物4：5GGAAGGATA3’
5. （3）研究人员在A系植株的基础上，去除产生光敏色素的基因后得到B系植株。随后，分别在黑暗条件和红光条件下培养A 、B两系植株，培养条件及观测到荧光的部位如下表所示。
  表1 GFP荧光的局部部位
  发育条件
  黑暗条件
  红光条件
  A系植物
  细胞质基质
  叶绿体
  B系植物
  细胞质基质
  细胞质基质
  根据以上研究结果， A系植株对红光刺激作出应答被激活的原因是
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1. (2024高三下·内江开学考) 桑果营养丰富，是一种药食同源食物。研究人员通过固定化乳酸菌对桑果发酵工艺进行改进。回答下列问题：
1. （1）将桑果和适当比例的水进行破碎得到果浆，过滤后获得桑果果汁。在保存营养物质的同时杀死果汁中的杂菌，可将果汁进行（填消毒或灭菌方法）。
3. （2）将乳酸菌培养基装入三角瓶后封口，然后置于灭菌锅中进行灭菌。影响高压蒸汽灭菌效果的因素有温度、压力、时间，以及（写出1点即可）。
5. （3）研究人员发现氯化钙浓度对乳酸菌包埋率有影响，实验结果如下表：
  氯化钙浓度／％
  10
  15
  20
  25
  3.0
  包埋率／％
  58
  72
  83
  80
  78
  请根据所学知识分析，上述结果形成的原因是。
7. （4）若要分离乳酸菌膜蛋白，将除去了细胞壁的乳酸菌原生质体加入蒸馏水使其吸水涨破，再用法分离得到乳酸菌细胞膜，加瓦解细胞膜后，再用固定化技术将磷脂分子分解为甘油、脂肪酸和胆碱，经其他方法除去杂质得到含多种膜蛋白的溶液，将该溶液用法分离，再做SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定，在电冰中用SDS处理的作用是。
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1. (2024高三上·娄底月考) 野生玉米“大刍草”经过9000多年人工驯化，被改造成现代玉米。我国中科院科学家经过不懈努力，从野生玉米中成功找回玉米人工驯化过程中丢失的一个控制高蛋白含量的优良基因THP9，克隆出来并将此高蛋白基因转移到玉米细胞内，获得了转基因高蛋白玉米新品种。构建基因表达载体时，若科研人员需将THP9基囚整合到质粒上（如图）。回答下列问题：
EcoRⅠ
BamHⅠ
KpnⅠ
MfeⅠ
HindⅢ
1. （1）扩增优良基因THP9使用技术，依据的原理是，扩增时，需在耐高温的DNA聚合酶催化下，在引物端进行DNA链的延伸。
3. （2）构建基因表达载体时，为获得能正确表达THP9基因的重组质粒，具体操作是。
5. （3）采用农杆菌转化法将优良基因THP9导入玉米细胞中，在含氨苄青霉素的培养基上培养获得的菌落不一定含有重组质粒，原因是。将新鲜的玉米叶片上取下的圆形小片与农杆菌共同培养，筛选转化细胞并培育成转基因植株。欲从个体水平检测转基因玉米是否培育成功，实验方法是。
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1. (2024高三上·娄底期末) 野生玉米“大刍草”经过9000多年人工驯化，被改造成现代玉米。我国中科院科学家经过不懈努力，从野生玉米中成功找回玉米人工驯化过程中丢失的一个控制高蛋白含量的优良基因THP9，克隆出来并将此高蛋白基因转移到玉米细胞内，获得了转基因高蛋白玉米新品种。构建基因表达载体时，若科研人员需将THP9基囚整合到质粒上（如图）。回答下列问题：
EcoR I
BamH I
Kpn I
Mfe I
Hind III
1. （1）扩增优良基因THP9使用技术，依据的原理是，扩增时，需在耐高温的DNA聚合酶催化下，在引物端进行DNA链的延伸。
3. （2）构建基因表达载体时，为获得能正确表达THP9基因的重组质粒，具体操作是。
5. （3）采用农杆菌转化法将优良基因THP9导入玉米细胞中，在含氨苄青霉素的培养基上培养获得的菌落不一定含有重组质粒，原因是。
  将新鲜的玉米叶片上取下的圆形小片与农杆菌共同培养，筛选转化细胞并培育成转基因植株。欲从个体水平检测转基因玉米是否培育成功，实验方法是。
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1. (2024高三上·扬州期末) 以洋葱为实验材料可进行多项实验。下列叙述错误的是（）

A . 用一定浓度的尿素溶液处理洋葱鳞片叶细胞，可观察到质壁分离和自动复原现象 B . 以洋葱为材料进行DNA粗提取时，加入的研磨液中往往含有洗涤剂和食盐 C . 显微镜观察洋葱根尖分生区的一个视野中，往往看不到细胞周期各时期的图像 D . 向洋葱根尖研磨液中加入双缩脲试剂后未出现紫色反应，表明该根尖中不含蛋白质

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1. (2024高三下·平江开学考) 某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。

下列叙述正确的是（　　）

A . Gata3基因的启动子无法控制GFP基因的表达 B . 翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白 C . 2号条带的小鼠是野生型，4号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子 D . 若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子

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1. (2024高三下·武汉开学考) 梨是我国原产果树之一，栽培历史悠久。梨清脆爽口，在市场上的需求较大，具有极强的经济价值、营养价值和药用价值，但梨采摘后在常温下容易腐烂，严重影响生产发展。某实验小组欲对梨的主要致腐菌进行分离鉴定，请回答下列问题：
1. （1）梨致腐微生物菌株分离与纯化
  实验小组采用平板划线法分离主要致腐菌并培养后，其中某个平板的第一划线区域长满了菌落，而其他区域均无菌落，原因可能是接种环灼烧后未冷却，还可能是。
3. （2）各致腐菌回接梨实验将不同的致腐菌依次制成菌液，将其分别回接到生长状况及大小均相同的新鲜无腐烂梨上，同时以为对照组，晾干后置于室温条件下储藏，每隔3d进行观察和记录，最终选取致腐能力强的致腐菌，并培养成菌落。
5. （3）致腐菌鉴定
  实验小组对筛选得到的致腐菌从菌落特征如（答出2点）等方面进行初步鉴定，再利用分子生物学、生物信息学等分析方法进行鉴定后，发现主要致腐菌中的一类是扩展青霉。
7. （4）生产实践中的快速检验
  在生产实践中，可通过PCR反应快速检测梨中的扩展青霉以达到防治梨腐烂的目的。在检测过程中，要根据扩展青霉特殊基因两端的碱基序列设计引物，如图为扩展青霉特殊基因的结构示意图，与之对应的引物结合的部位是（用图中数字作答）。若已知该基因的引物Ⅰ，能否依据其碱基序列设计出另一种引物Ⅱ？，理由是。
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1. (2024高三下·茂名月考) 在细菌和病毒类疾病检测、遗传疾病诊断、肿瘤筛查和诊断中，都可采用PCR技术。PCR反应由变性→复性→延伸三个基本反应步骤构成，PCR完成以后常需要鉴定PCR的产物。下列叙述正确的是（）

A . 变性：耐高温的DNA聚合酶将双链DNA解链为单链 B . 复性：两种引物与两条单链DNA结合不必控制温度 C . 延伸：4种脱氧核苷酸加到引物的5端 D . 鉴定：DNA 聚合酶质量不好可能导致鉴定结果不仅有一条带

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1. (2024高三下·衡阳开学考) “中天杨”是由我国科学家采用生物转基因技术，历经8年时间培育成功的抗盐碱、耐干旱的杨树新品种。该品种以八里庄杨为实验材料，经转mtl-D基因培育获得。如图为培育“中天杨”的操作流程，①~⑥表示操作过程，该过程中可能用到的限制酶如表所示。回答下列问题。
注：Ti质粒中的Tet^r为四环素抗性基因，Amp^r为氨节青霉素抗性基因。
限制酶
BclⅠ
EcoRⅠ
XbaⅠ
Sau3AⅠ
BamHⅠ
切割位点
T↓GATCA
G↓AATTC
T↓CTAGA
↓GATC
G↓GATCC
1. （1）与杂交育种相比，基因工程育种的优点有(填序号)。
  ①操作方法简便②目的性强，能定向改造生物性状③育种周期短④不受生殖隔离限制，能克服远缘杂交不亲和障碍⑤安全性高，对生态没有威胁
3. （2）过程①需要的酶是，过程②需要的工具酶是。
5. （3）采用PCR技术扩增目的基因时，在PCR反应体系中需加入引物，引物的作用是，若目的基因扩增3代，则共用引物个。PCR完成以后，常采用法来鉴定PCR的产物。
7. （4）培育转基因杨树的核心工作是，在进行该工作时，应在mtl-D基因的两侧添加限制酶的识别序列。
9. （5）将目的基因导入受体细胞除图示方法外，还有。为了确认目的基因在植物细胞中是否成功表达，从分子水平通常使用法进行检测。
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	发育条件
	黑暗条件	红光条件
A系植物	细胞质基质	叶绿体
B系植物	细胞质基质	细胞质基质

限制酶	BclⅠ	EcoRⅠ	XbaⅠ	Sau3AⅠ	BamHⅠ
切割位点	T↓GATCA	G↓AATTC	T↓CTAGA	↓GATC	G↓GATCC

氯化钙浓度／％	10	15	20	25	3.0
包埋率／％	58	72	83	80	78

EcoRⅠ	BamHⅠ	KpnⅠ	MfeⅠ	HindⅢ

EcoR I	BamH I	Kpn I	Mfe I	Hind III