1.  柠檬酸是一种应用广泛的有机酸，生产时需接种黑曲霉孢子在密闭发酵罐中发酵。回答下列问题：

1. （1） 黑曲霉发酵前需要进行菌种的扩大培养，其目的是；菌液接种到发酵罐前，菌液的孢子数可用在显微镜下测定。
3. （2） 柠檬酸主要来自糖代谢途径，因而合成柠檬酸的主要原料来自培养基成分中的；同时，培养基配制完成后需要湿热灭菌，湿热灭菌与干热灭菌相比的优点是（答出两点即可）。
5. （3） 黑曲霉在密闭发酵罐生产柠檬酸，发酵过程中通过增加发酵液的溶氧量；为保证发酵过程的连续性，并解决营养物质不足和有害物质增加的问题，生产中可采取的措施是。
7. （4） 黑曲霉发酵产柠檬酸受柠檬酸合酶调控，为将该酶对应的基因序列连接到载体，请写出实验思路。