1.  表皮生长因子受体(EGFR)是原癌基因表达的产物。EGFR由胞外区、跨膜区(跨细胞膜区)、胞内区三部分组成，EGFR与某些对应物质结合后能引起一系列基因活化，导致肿瘤细胞增殖。DNEGFR基因是EGFR基因缺失了胞内区的突变基因，科研人员研究了DNEGFR基因表达和定位情况，流程如下图，请回答：

1. （1） 从人结肠癌组织中提取总RNA，经过程合成cDNA.根据人EGFR前体cDNA的序列设计合成引物，扩增得到DNEGFRcDNA，其表达产物因缺失胞内区而没有信号转导功能，但其能够与竞争结合某些对应物质，从而达到抑制肿瘤细胞增殖的作用。
3. （2） PCR过程所用引物如下，据上图可知，构建重组质粒时使用的两种限制酶是。研究人员将DNEGFR和EGFP融合在一起的目的是。

   5'-AAAAGCTAGCACCATGCGACCCTCCGGGAC-3'

   5'-TAATCCGCGGTACGTACCGCATGAAGAGGCCGATCCC-3'

5. （3） 向感受态细菌悬浮液中加入重组质粒混匀。扩大培养后取菌液涂布于含有的固体培养基平板上，37℃正向放置0.5h，然后倒置平皿37℃培养12~16h.挑选菌落分别扩增、鉴定，待鉴定正确后大量提取质粒。
7. （4） 将重组质粒pEGFP-N1-DNEGFR包裹到主要由构成的脂质体内，与动物细胞发生融合，重组质粒最终发生转化。72h后再利用光谱激光扫描共聚焦显微镜观测结果见图A，检测表明融合蛋白成功锚定于。为了让结果更加严谨，设置B、C两组对照，推测B组的处理方式是