1.  人绒毛膜促性腺激素是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，由a链和β链（hCGβ）结合而成。近年研究显示，hCGβ可表达于结肠癌等多种恶性肿瘤细胞，与肿瘤的发生、发展及转移有一定关系。研发抗hCGβ疫苗已成为近年来肿瘤生物治疗新的热点，下图1为其制备的基本方案。请分析回答下列有关问题：

注1：甲序列指导合成的信号肽能引导后续合成的肽链进入内质网腔

注2：AOX1为甲醇氧化酶基因的启动子，只能在以甲醇为唯一碳源的培养基中正常表达

1. （1） 图中hCGβ基因需要与甲序列一起构建形成融合基因，其目的是。
3. （2） 当目的基因两侧的小段序列与基因表达载体上某序列相同时，就可以发生同源切割，将目的基因直接插入。同源切割是一种代替将目的基因导入基因表达载体的方法。
5. （3） 阶段Ⅱ将环化质粒导入用处理的大肠杆菌，然后在含有的培养基中筛选得到含hCGβ基因表达载体的大肠杆菌后进行扩增。
7. （4） 为了检验重组质粒是否构建成功，提取大肠杆菌中的质粒为模板，设计相应的引物进行PCR扩增，则最好选择图2中的引物。PCR反应体系中需加入模板、、、引物、Mg²⁺、缓冲液等，再将扩增产物进行来确定可用于导入酵母菌的重组质粒。

   

9. （5） 阶段IV需将处理后的酵母菌接种在培养基上培养，该培养基不需要添加以下哪些成分（a．氨苄青霉素b．组氨酸c．无机盐d．琼脂），可在此培养基上生长的酵母菌即为含有hCGβ基因表达载体的目的菌株。将此菌株扩大培养后，离心取上清液，用进行检测。若上清液中能检测到hCGβ蛋白，则说明hCGβ基因得以表达。
11. （6） 从生产控制的角度分析，选用AOX1作为hCGβ基因启动子的优点是。