1.  梨是我国原产果树之一，栽培历史悠久。梨清脆爽口，在市场上的需求较大，具有极强的经济价值、营养价值和药用价值，但梨采摘后在常温下容易腐烂，严重影响生产发展。某实验小组欲对梨的主要致腐菌进行分离鉴定，请回答下列问题：

1. （1） 梨致腐微生物菌株分离与纯化

   实验小组采用平板划线法分离主要致腐菌并培养后，其中某个平板的第一划线区域长满了菌落，而其他区域均无菌落，原因可能是接种环灼烧后未冷却，还可能是。

3. （2） 各致腐菌回接梨实验将不同的致腐菌依次制成菌液，将其分别回接到生长状况及大小均相同的新鲜无腐烂梨上，同时以 为对照组，晾干后置于室温条件下储藏，每隔3d进行观察和记录，最终选取致腐能力强的致腐菌，并培养成菌落。
5. （3） 致腐菌鉴定

   实验小组对筛选得到的致腐菌从菌落特征如 （答出2点）等方面进行初步鉴定，再利用分子生物学、生物信息学等分析方法进行鉴定后，发现主要致腐菌中的一类是扩展青霉。

7. （4） 生产实践中的快速检验

   在生产实践中，可通过PCR反应快速检测梨中的扩展青霉以达到防治梨腐烂的目的。在检测过程中，要根据扩展青霉特殊基因两端的碱基序列设计引物，如图为扩展青霉特殊基因的结构示意图，与之对应的引物结合的部位是 （用图中数字作答）。若已知该基因的引物Ⅰ，能否依据其碱基序列设计出另一种引物Ⅱ？，理由是 。