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  • 1. 甜味蛋白是一类具有甜度高,热量低等特性的天然甜味剂,有望经生物技术改造和量产后能广泛应用于食品,饮料,药品生产等。莫内林最初是从一种西非植物的浆果中分离提纯到的甜味蛋白,甜度是蔗糖的3000倍左右。图1图示利用大肠杆菌生产莫内林,其中M基因可表达合成莫内林。下表是为PCR扩增M基因设计的引物,画线部分是所需使用的限制性内切核酸酶的识别序列。

    引物1

    5’GGAATTCCATATGGGCGAATGGGAAATTATCG3’ 

    引物2

    5’TTTGGATCCTTACGGCGGCGGAACCGGAC3’

    1. (1) 引物1的结合位点可能在(选填图6中的编号)。画线部分的序列在A中(有/没有),在B中(有/没有)。
    2. (2) 已知C中的培养基成分有水、酵母粉、蛋白胨和氯化钠,并按一定比例添加氨苄青霉素。将C中有生长优势的菌落经扩大培养后作为菌种在发酵罐中培养,积累产物,以下操作合理的是____。(多选)
      A . 发酵罐和培养基需严格灭菌 B . 发酵罐中培养基成分可去掉氨苄青霉素和琼脂 C . 为避免杂菌污染,培养过程中不能补充培养基 D . 培养过程中,只需合理控制好温度和pH
    3. (3) 为了探究莫内林对血糖浓度的影响,将上述大肠菌生产的莫内林配制成与20mg/L蔗糖溶液等甜度阈值的浓度胃灌空腹小鼠,得实验结果如图2(a),另用不同浓度的莫内林溶液胃灌空腹小鼠,实验结果如图2(b)

      结合相关信息和所学知识,分析实验可知____。(多选)

      A . 莫内林可升高血糖,不适宜作为代糖 B . 与蔗糖相比,莫内林升血糖的效果不显著 C . 莫内林和蔗糖原素组成相同,因此可转化为血糖 D . 一定范围内,莫内林对血糖的影响不随其浓度显著变化
    4. (4) 通过大肠杆菌生产的莫内林甜度较天然莫内林大为降低,天然莫内林也易因温度等降低甜度甚至甜味消失,请结合所学知识和利用相关的生物技术,分析两种莫内林甜度降低的原因并提出进一步改进的工程思路。