1. 希尔反应是测定叶绿体活力的常用方法。希尔反应基本原理：光照下，叶绿体释放O₂ ， 同时氧化型DCI(2，6一二氯酚靛酚)被还原，颜色由蓝色变成无色。DCIP颜色变化引起的吸光率变化可反映叶绿体活力。硏究小组利用菠菜叶进行了叶绿体活力的测定实验。回答下列问题：

1. （1） 制备叶绿体悬液：选取10g新鲜的菠菜叶加入硏钵，研磨前加入适量的0.35mol/L.NaCl溶液和pH7.8的酸碱缓冲液等；研磨成匀浆后，用纱布过滤，取滤液进行，分离得到叶绿体；将叶绿体置于溶液中，以保证叶绿体的正常形态，获得叶绿体悬液
3. （2） 测定叶绿体活力：分组如下，并按下表加入试剂；测定各组吸光率

   试管号	磷酸缓冲液(mL)	叶绿体悬液(mL)	煮沸(min)	DCP(mL)
   1	9.4	0.1	_	0.5
   2	9.4	0.1	5	0.5
   3	9.4	0.1	_	_

   注：“-”表示不处理或不加入

   ①希尔反应模拟了光合作用中阶段的部分变化，该阶段在叶绿体的中进行。氧化型DCIP在希尔反应中的作用，相当于在该阶段中的作用

   ②煮沸处理后，需向2号试管中加入一定量的，以保证各试管中液体的量相等。

   ③3号试管的作用是。